毛乳头细胞在毛囊的生长发育、周期调控及维持毛发生长中起主导作用。毛乳头细胞的凝集性生长特性与其调控毛囊生长功能有紧密联系。我们前期研究从凝集性生长状态的毛乳头细胞中克隆出造血干细胞分化相关基因HSPC016，通过对其功能的研究证实其可作为毛乳头细胞核内转录起始因子的功能亚单位而发挥基因转录调控作用。但是其发挥调控作用的分子机制尚未清楚。本课题以现有的研究结果为线索，拟采用酵母单杂交寻找HSPC016蛋白调控的基因靶位、采用酵母双杂交技术筛选和验证与HSPC016蛋白存在相互作用蛋白质，并对这些基因和蛋白进行功能研究和分析，以深入探讨HSPC016在毛乳头细胞生长和功能调控中的的作用机制及可能存在的上下游调控模式。本项目将为揭示HSPC016基因调控毛乳头细胞生长的分子机制和潜在生物学功能提供新的实验基础。

利用细胞免疫荧光和还原型线粒体特异性荧光探针并结合激光共聚焦显微镜技术证实HSPC016蛋白位于胞浆内线粒体上。通过荧光半定量PCR发现HSPC016基因随着毛乳头细胞（DPCs）传代数的增加表达逐渐下降。运用在线软件Cister对HSPC016基因5'端2000bp进行启动子特征分析，结果表明其5'侧翼区在-200～-1bp及-1000～-600bp两段区域间顺式作用元件呈高频分布；构建4个启动子荧光素酶报告基因载体，分别转染第3代和第8代的DPCs中，结果提示HSPC016可能是通过－600～－200之间的调控元件发挥转录调控的作用。应用酵母双杂交系统，将成功构建的pGBKT7-HSPC016诱饵质粒与含原代人毛乳头细胞cDNA 文库质粒的酵母Y187 进行配合，筛选出了 4个与HSPC016有相互作用的蛋白，包括转录调节因子FOXO1、丝裂原活化蛋白激酶11、磷酸次黄苷酸激酶3调节亚单位、LX受体，它们均与细胞内能量代谢、转录调节相关。基于目前的研究结果，HSPC016可能通过与多种信号分子或受体相互作用，参与细胞内活性氧(ROS)水平调节并调节毛乳头细胞的凝集性生长状态。