中文摘要
阿萨希毛孢子菌(T. asahii)是播散性毛孢子菌病的主要病原菌,可导致系统性、致命性感染。目前国内外对该病和该菌的研究较少,尤其是在T. asahii生物被膜及其调控基因方面尚未见有研究报道。本课题组自2001年起率先对该病及该菌进行了临床诊断治疗、宿主免疫基因差异表达、重要的细胞因子如GM-CSF、IL-10、TNF改变、该菌的培养特征、菌落形态、光镜和电镜下结构、ITS、26S rDNA序列和动物致病性等方面的研究。最近我们在T. asahii菌观察到生物被膜的形成,鉴于生物被膜是多种真菌的重要抗药性因子,本课题组拟进行T.asahii 生物被膜的系统研究,测定其形成的各种影响因素;制备特异性荧光探针;利用cDNA微列阵技术分析生物被膜表达的差异基因,RT-PCR和Mu突变确定调控基因。明确生物被膜在该菌抗药性中的作用,并为该菌的治疗提供新的靶点。
结题摘要
按照年度计划在临床分离株在医学材料表面构建BF,从形态结构观察生物膜活性;采用FDA/PI双荧光染色和激光共聚焦显微镜相结合的技术观察成熟期生物膜菌分布和活性。观察不同材料,不同温度,不同pH值培养基等条件下对T. asahii BF形成能力的差异;应用壳聚糖观察其对形成生物膜的影响;壳聚糖对T. asahii表达的TUP1基因的影响。结果显示T. asahii在聚苯乙烯表面形成生物膜;T. asahii BF与基质形成一个复杂的三维立体结构;pH=7.0时生物膜形成表现为缓慢的非线性生长;48h时活性由高到低为聚芳脂=聚氯乙烯>聚苯乙烯>玻璃;35℃以上稳定性逐渐降低。1.25mg/mL壳聚糖溶液明显具有抑制BF形成的作用;壳聚糖在基因表达上游水平影响TUP1表达增加。已经发表中文论文4篇,投稿中文1篇,投稿外文1篇,培养研究生1名。
