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镉诱导华溪蟹金属硫蛋白的分离纯化与基因克隆

镉诱导华溪蟹金属硫蛋白的分离纯化与基因克隆
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  • 批准号:30640051
  • 批准年度: 2006年
  • 学科分类:水产免疫生物学(C190601) |
  • 项目负责人:王兰
  • 负责人职称:教授
  • 依托单位:山西大学
  • 资助金额:10万元
  • 项目类别:专项基金项目
  • 研究期限:2007年01月01日 至 2007年12月31日
  • 中文关键词: 镉诱导华溪蟹金属硫蛋白;分离;纯化;基因克隆
  • 英文关键词:..

项目摘要

中文摘要

金属硫蛋白(Metallothionein, 简称MT)是一类与生物体解毒有关的金属结合蛋白,具有非常重要的生理及生物学功能。本研究利用蛋白质分离、纯化、测序和基因克隆等高级生物化学及分子生物学方法和技术手段,以河南华溪蟹(Sinopotamon yangtsekiense)为研究对象,对镉诱导下产生的MT进行分离、纯化、MTcDNA扩增及其基因克隆、MT基因亚型的比较、MT多态性及其生态服务功能

结题摘要

金属硫蛋白(Metallothionein,MT)是一类低分子量、富含半胱氨酸、能被金属诱导并结合多个金属原子的特殊非酶蛋白质,广泛存在于动物、植物及微生物中。蟹类是低等指示生物在水体环境代表性的物种。故本实验以河南华溪蟹(Sinopotamon henanens)为材料,从毒理学、生化及分子水平对MT进行了深入系统的研究。内容主要包括:(1)镉诱导华溪蟹不同组织(肝胰腺,鳃、肌肉、卵巢)MT的表达及镉蓄积状况,并探讨二者之间的关系。(2)经镉诱导,丙酮沉淀,Sephadex G-50凝胶过滤层析,DEAE-Superose Fast Flow离子交换层析,透析脱盐,冷冻干燥,从肝胰腺中分离纯化了MT,得到了纯度较高的华溪蟹MT,其主要以单体及二聚体形式存在,分子量分别为6890.6Da及13766.5Da。(3)经RT-PCR 扩增MT cDNA片段,进一步以3'-Race 及5'-Race法扩增3'端及5'端基因序列,获得了633bp的MT cDNA全长序列,阐明了华溪蟹MT的一级结构,补充完善了水生无脊椎动物MT的研究内容,为利用MT进行环境监测及重金属污染治理奠定了科学基础。

评估说明

    国家自然科学基金项目“镉诱导华溪蟹金属硫蛋白的分离纯化与基因克隆”发布于爱科学iikx,并永久归类于相关科学基金导航中,仅供广大科研工作者查询、学习、选题参考。国科金是根据国家发展科学技术的方针、政策和规划,以及科学技术发展方向,面向全国资助基础研究和应用研究,发挥着促进我国基础研究源头创新的作用。国科金的真正价值在于它能否为科学进步和社会发展带来积极的影响。

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