新近发现灭活与否的问号钩端螺旋体（简称钩体）均能诱导相似的细胞凋亡率但不同细胞凋亡率有明显差异、胞内Ca2+ 瞬时脉冲及PLC/PKC通路负责传导内化信号，但凋亡主要途径及其调控机制不明。在以往工作基础上，我们拟用问号钩体细胞凋亡模型，采用流式细胞、免疫荧光、激光共聚焦、基因工程等技术，确定问号钩体诱导不同细胞凋亡的主要分子途径及其差异，同一细胞群体中不同周期细胞对凋亡的影响；鉴定问号钩体表面有FasL作用的分子及其功能，确定问号钩体鞘磷脂酶类基因产物催化生成神经酰胺及其参与或调节细胞凋亡的可能性；了解Ca2+和PLC启动的PKC及其下游各MAPK信号支路通过改变Bcl-2家族蛋白表达量调节细胞凋亡的作用。由于细胞凋亡对问号钩体免疫逃避及在机体组织细胞内生存有重要作用，故本项目研究结果不仅有助于阐明问号钩体致病机制，也为防治钩体病提供新的思路和实验依据，具有较高的创新性和较大的学术价值。

本研究项目拟建立问号钩体诱导凋亡或坏死的多种细胞模型。利用不同细胞模型，确定问号钩体诱导不同细胞凋亡的主要信号传导通路的差异和特点。若问号钩体主要通过FasL/Fas途径诱导细胞凋亡，则对有FasL作用的问号钩体表面分子及其功能进行鉴定。明确与Bcl-2家族成员对问号钩体诱导细胞凋亡中的调节作用。确定问号钩体鞘磷脂酶基因产物催化生成神经酰胺的aSMase功能及经神经酰胺-SAPK/JNK通路调控细胞凋亡的作用。以期阐明问号钩体诱导不同宿主细胞凋亡的主要途径及调控细胞凋亡相关信号传导通路和机制。研究结果不仅有助于阐明问号钩体致病机制，也可为更有效地防治钩体病提供新的思路和实验依据。