中文摘要
利用杜仲和杨树等自然生长的树木作为实验系统,以其休眠期的维管形式层区域细胞、组织为实验材料,用电镜、免疫电镜、免疫酶联、免疫胶体金和基因表达的差异显示等技术,研究比较其生理休眠期和被动休眠期在原生质体和细胞壁超微结构、内源IAA浓度和分布、特毂泶锏牡鞍字实戎疃喾矫娴牟钜欤蕴教至礁鲂菝咂诩涞牟煌约靶菝呋怼
结题摘要
本项目超额完成了原计划。不仅在杜仲形成层生理休眠(R)期发现了特异表达的蛋白质,还克隆到两个在R期表达的过氧化物酶基因,一个在活动期表达强、被动休眠期表达弱、R期基本不表达的ACTIN基因。更重要的是证明了内源IAA和ABA在整个形成层活动周期中呈相反的变化,在活动期(A)内源IAA含量最高,在被动休眠期(Q)含量较少,而在R期则几乎检测不到。与之相反,ABA则是在R期最高,Q期较高,A期最低。并进一步证明ABP1可能是IAA的受体,克隆了编码ABP1的cDNA片段,还证明ABA可抑制该基因的表达,低温可诱导其表达,IAA可促进其表达。为进一步揭示形成层休眠的分子机理打下了良好基础。另外还证明木质部分化过程为典型的细胞编程死亡(PCD),除了原来检测到的DNase外,还检测到了PCD中起关键作用的caspase-3、caspase-8和PARP等的类似物。并已从毛白杨中分离纯化了一DNase,克隆了其基因,初步证明是一CAD,而且初步证明木质部的次生壁构建发生在DNA已发生片段化之后,进而由这些结果提出了木质部细胞分化机理的模型。还在杜仲雌株中找到与性别有关的一分子标记。
