申请者首次从广西海带中纯化获得一个含量较高的多糖组分L01，分子量测定和红外色谱分析提示其为新的多糖组分。药效研究表明L01具有抗血栓形成和抑制血小板功能的作用，该作用与其保护内皮细胞有关。L01能够减轻实验动物血管内皮损伤程度，提高血浆PGI2水平，减少内皮损伤标志物vWF、GMP-140和PAI-1的释放和表达。因此L01具有作为抗血栓新药研究开发的前景。本项目拟通过纸层析、气相色谱、红外色谱和质谱分析L01的结构特点，比较其化学结构与其它来源的海带多糖有何不同；通过整体动物和体外内皮细胞实验，从调节内皮细胞止血与抗血栓功能平衡角度探讨L01抑制血栓形成的作用机制，探讨在内皮损伤或内皮细胞受刺激的条件下，L01如何通过影响TF、vWF、PAI、TFPI、t-PA和PGI2的分泌及表达，维持内皮细胞适度的凝血活性和纤溶活性及机体血小板功能，从而产生抑制血栓形成的作用。

本项目旨在研究海带多糖L01抗血栓作用与调节内皮细胞抗凝与止血功能平衡的关系。通过纸层析和红外色谱分析，了解L01由葡萄糖醛酸、岩藻糖、半乳糖、甘露糖、木糖、鼠李糖通过1→6β、1→3β和1→3ａ糖苷健连接而成。建立血管内皮细胞损伤动物模型（电刺激法和内毒素法），观察L01对模型动物血栓形成的抑制、对内皮细胞损伤的防护和对血液凝固活性的影响；培养人脐静脉内皮细胞（HUVEC）实验（内毒素法），观察L01对内皮细胞超微结构损伤的防护作用、对内皮细胞抗凝活性、纤溶活性的影响。结果发现L01能够有效地防护有害刺激引起的损伤，维护血管内皮细胞的正常结构，继而使内皮细胞抗凝、纤溶活性增强而促凝活性降低，表现为动物血浆活化部分凝血酶时间、凝血酶原时间、凝血酶时间延长、血小板聚集率降低、凝血酶-抗凝血酶复合物形成减少；HUVEC内皮型一氧化氮合酶和前列环素分泌增多，前列环素mRNA表达增加、纤溶酶原激活物抑制物mRNA表达减少、诱导型一氧化氮合酶表达减少。据此，可以确定L01抗血栓形成作用依赖于保护内皮细胞，调节凝血与抗凝功能平衡。