本项目是对前一个已结题的国家自然科学基金的深化研究。课题组前期实施国家自然科学基金过程中，从方证相应角度，以炎症通路中多种炎症因子为关注对象，探讨了桑菊饮的抗炎解表作用和机制，发现了抑制IL-1、IL-6、TNF等炎症细胞因子的分泌量可能是桑菊饮含药血清辛凉解表的分子机理。本次申报的项目是在原有工作基础上，围绕桑菊饮的临床主证—咳嗽，引入现代生命科学的新发现—咳嗽病理的发生与TRPV1感受通路密切相关，以多种炎症因子的共同作用通路—伤害性感受TRPV1通道及其通路中的关键信号分子为关注点，采用整体和离体相结合的方法，继续深入挖掘桑菊饮临床发挥止咳效应的分子基础和配伍机制，使传统中医药方剂的研究追踪现代医学发展前沿，从而提升中医药研究水平，完善和发展中医药理论，提高中医药临床服务能力，并为中药新药的开发打下坚实基础。

This project is one continual study of the last completed National Natural Science Foundation of China. In the last project, from the perspective of corresponding of formulas to syndrome, with a variety of inflammatory cytokines in inflammatory pathways in concern, we studyed the role of Sangjuyin in relieving inflammatory symptoms, and found that inhibition of Sangjuyin to the secretion of IL-1, IL-6 and TNF may be the molecular mechanism of its therapeutic effecs in the clinics. The project is based on the original work, concerning the clinical main therapeutic orientation of Sangjuyin - cough, targeting the common pathway of a variety of inflammatory cytokines - nociceptive TRPV1 channel and its key signaling molecule in the path of concern, using a combination methods, continue to explore Sangjuyin molecular basis of clinical effect and compatibility mechanisms in vivo and in vitro, allowing researchers to track traditional Chinese medicine prescription forefront of the development of modern medicine, so as to enhance the level of medical research, improvement and development of Chinese medicine theory, thus to improve clinical service capabilities, and lay a solid foundation for the development of new Chinese medicine.

桑菊饮是中医经典著作《温病条辨》中著名的方剂，由桑叶、菊花等药配伍组成，具有疏风清热，宣肺止咳的功效。临床上常应用于治疗外感咳嗽、急性支气管炎、上呼吸道感染、肺炎等属风热犯肺或肝经风热症等呼吸系统疾病。现代药理研究表明桑菊饮具有明显的抗炎、抑菌、抗氧化及保护线粒体作用、抗急性肺损伤、解热发汗、抑制肠蠕动和提高免疫功能等作用，但其药效学及临床配伍研究还不够深入，作用机制尚不明确。本项目分别从整体动物和细胞两个层面，采用辣椒素刺激小鼠咳嗽模型和辣椒素体外刺激原代三叉神经节细胞模型，基于TRPV1受体对桑菊饮的止咳作用及其机制进行了新的探索，并通过桑菊饮拆方研究了其配伍机理。整体研究结果发现，经桑菊饮全方及拆方干预后，与模型组相比，桑菊饮全方组小鼠的咳嗽次数明显减少，三叉神经节中SP的含量较模型组有所降低，气管支气管中TRPV1基因和蛋白的表达量较模型组有不同程度的降低，且中剂量组效果最佳。桑菊饮拆方各组与模型组相比，咳嗽次数未见明显变化，SP释放量、气管支气管中TRPV1基因和蛋白的表达量均有降低的趋势，但不具有统计学意义。桑菊饮拆方的各高、中、低剂量组给药前后减少的咳嗽次数分别与全方高、中、低相比，结果具有显著性差异，说明桑菊饮全方组效果更优。体外实验研究结果显示，桑菊饮全方含药血清培养基培养三叉神经节神经元12 h后，与模型组相比，全方高剂量组的SP含量明显减少，TRPV1mRNA及蛋白均有不同程度的降低，提示桑菊饮高剂量组可能通过TRPV1通路对细胞功能进行调节。本研究为桑菊饮的临床应用和进一步的开发提供科学依据。