中文摘要
KOA病理改变为软骨细胞凋亡,温针灸治疗KOA疗效确切,可激活JNK通路治疗KOA。BMSCs参与软骨组织重建修复,JNK通路介导向软骨细胞分化。预实验发现温针灸血清诱导BMSCs向软骨细胞分化。本研究从两方面验证该假说:⑴KOA模型兔行温针灸等干预,HE染色及TUNEL细胞凋亡检测明确其引起软骨细胞增殖,起到类BMSCs作用;⑵兔BMSCs培养至P3行GFP基因转染,注射至造模后兔膝关节腔,免疫组化测II型胶原分布及GFP蛋白表达;RT-PCR测JNK表达,明确温针灸调控JNK通路,诱导BMSCs向软骨细胞分化,修复软骨缺损治疗KOA。
英文摘要
KOA pathological changes is apoptotic chondrocytes. It is efficacy by warm acupuncture treatment. JNK pathway can be activated. BMSCs participate in the side of reconstruction and repairing of cartilage tissue. Chondrocyte differentiation is mediated by JNK Pathway. It was found that the warm acupuncture serum induced BMSCs into chondrocytes. About this research, to test the hypothesis in two ways : ⑴KOA rabbits are treated by warm acupuncture, clearing chondrocyte proliferation and effect of BMSCs. ⑵KOA rabbits BMSCs are cultured to P3, injecting them into the rabbit knee joint cavity. Type II collagen ,GFP and JNK expression are measured.To define BMSCs into chondrocytes by warm acupuncture.
结题摘要
背景膝骨性关节炎(KOA)是中老年人常见病,前期研究发现KOA病理改变为软骨细胞凋亡,温针灸治疗KOA疗效确切,可激活JNK通路治疗KOA。骨髓间充质干细胞(BMSCs)参与软骨组织修复重建,JNK通路介导向软骨细胞分化。预实验发现温针灸血清可诱导BMSCs向软骨细胞分化。研究内容制备兔KOA模型行温针灸等干预,治疗结束后取患侧关节软骨,采用HE染色及TUNEL细胞凋亡检测软骨细胞数量;免疫组化检测II型胶原分布及GFP蛋白表达;RT-PCR等方法检测JNK1、JNK2、GFP、BAX表达,明确温针灸调控JNK通路,诱导BMSCs向软骨细胞分化,修复软骨缺损治疗KOA。结果①温针灸治疗兔KOA可能是通过促进软骨修复,延缓软骨退变,起到了类干细胞的作用。②温针灸联合BMSCs移植治疗兔KOA效果优于单纯温针灸和单纯BMSCs移植。数据①大体观察见:温针灸联合BMSCs组软骨关节面光滑,软骨透明度降低,虽有细小缺损,但明显优于模型组(P<0. 05);②HE染色见,温针灸联合BMSCs组软骨细胞分布均匀,排列整齐,细胞形态饱满,软骨细胞数量较温针灸组和干细胞组有所增多(P <0. 05)。Mankin`s评分中,温针灸联合BMSCs组、温针灸组、BMSCs组分值均低于模型组(P<0. 05),且温针灸联合BMSCs组Mankin`s评分又分别低于温针灸和BMSCs组(P<0. 05)。③免疫组化检测各组软骨基质中II型胶原表达含量,模型组均明显低于空白组、温针灸组、BMSCs组、温针灸联合BMSCs组(P<0.05),温针灸联合BMSCs组分别高于温针灸组和BMSCs组(P<0.05)。科学意义本课题通过动物实验证实温针灸治疗KOA起到了类干细胞的作用,且温针灸联合BMSCs治疗KOA效果优于单纯温针灸和单纯BMSCs移植,从现代医学角度阐明其治疗机理,为临床推广使用温针灸疗法提供依据。
