中文摘要
TEL/AML1融合基因是儿童ALL最常见的突变，临床对此类患儿的分组及治疗存在争议，已成为治疗选择及预后评价的重要难题，目前其发病及复发机制缺乏深度研究。本课题前期转录组测序中发现N6-腺苷-甲基转移酶METTL3在此类患者中高表达，这是首次将mRNA甲基化酶引入ALL，为其发病及复发机制提供新思路，为临床提供新的分子标志。本课题通过对儿童TEL/AML1阳性患者中METTL3及相关指标的表达水平分析，METTL3对TEL/AML1阳性ALL细胞增殖、迁移、周期的影响，明确METTL3在儿童TEL/AML1阳性ALL中的表达情况，明确METTL3对TEL/AML1阳性ALL相关基因表达的影响，明确METTL3对TEL/AML1阳性儿童ALL药物耐受性及敏感性的影响，提供TEL/AML1阳性ALL的预后指标，探讨METTL3基因在儿童ALL中发病及复发中的作用机制。
英文摘要
TEL/AML1 fusion gene is the most common children ALL mutation, there is a dispute on the packet and clinical treatment of such children, the problem has become an important treatment option and prognosis evaluation. Currently the incidence and recurrence mechanism is unknown, lack of in-depth research. Early this subject we found N6-adenosine-methyltransferase METTL3 highly expressed in such patients though transcriptome sequencing , this is the first time the introduction of mRNA methylase in ALL,provide new ideas for clinical incidence and recurrence mechanisms ,provide the new molecular markers. Through this study we analysis the METTL3 and related indicators expression level of the child TEL / AML1-positive ALL patients , METTL3 of TEL/AML1-positive ALL cell proliferation, migration, the impact of the cycle, a clear METTL3 children TEL/AML1-positive ALL, the expression clear METTL3 on TEL/ AML1-positive ALL related gene expression, METTL3 TEL/AML1 positive childhood ALL drug resistance and susceptibility to provide TEL/AML1-positive ALL prognostic indicator ,explore METTL3 gene in children with ALL the incidence and recurrence mechanism.
结题摘要
急性淋巴细胞白血病（ALL）是儿童时期最常见的恶性肿瘤，近年来越来越多的体细胞遗传学改变得以鉴定，使儿童ALL的分类不断完善，但仍存在未知的分子遗传学标记物待人们发掘。近年来越来越受关注的mRNA表观遗传化修饰-m6A，鉴于其在小鼠的胚胎干细胞的分化调控中发挥重要作用，因此被选为此课题的关键指标。在本研究课题中，我们选择33例伴TEL/AML1融合基因阳性的ALL-B患儿作为实验组，选择8例非血液病的儿童作为对照组，采用q-PCR法检测两组病人以下基因的相对表达量，包括m6A甲基转移酶METTL3、METTL14、WTAP和m6A去甲基转移酶FTO、ALKBH5。结果显示上述5种与m6A密切相关的基因中除了WTAP外，实验组中其他4种基因的相对表达量明显高于对照组，具有统计学差异（P＜0.05）；此外还发现除了基因WTAP外其他四种基因的相对表达量在诱导缓解化疗结束后明显低于初诊时的基因表达水平，同样也具有统计学差异（P＜0.05）；进一步统计学分析发现ALKBH5与METTL3基因的表达水平与患儿骨髓中原始幼稚细胞的百分比成正比（P分别为0.049,0.0152），但与其他临床特征无关。进一步的细胞实验发现，在体外细胞系REH（伴TEL/AML1融合基因阳性的ALL-B细胞系）中敲低METTL3基因会导致细胞生长受抑制、凋亡增多，推测该基因可能作为ALL-B尤其是TEL/AML1融合基因阳性的ALL患儿治疗的一个潜在靶点。