类风湿关节炎（RA）是一种以关节滑膜炎为特征改变的慢性自身免疫疾病，滑膜炎持久反复发作引起关节软骨破坏。大量文献和我们前期研究证明，CD147对导致RA软骨损伤的关键介质-基质金属蛋白酶（MMPs）的生成起调控作用。中药秦艽提取物（GMI）可保护RA软骨损伤，但其作用机制及物质基础尚不明确。我们发现高糖基化 CD147 和 N 糖基化转移酶（GnT-V）在 RA 滑膜细胞中高表达，而GnT-V含量和MMPs的异常分泌存在功能相关性；预实验结果表明GMI可抑制RA中高表达的GnT-V，降低高糖基化CD147及MMPs水平。本课题拟在此基础上通过RA动物模型验证GMI抗RA软骨损伤的作用；阐明GMI通过CD147/p38/NF-κB通路调节MMPs生成的机制；探索GMI中治疗RA的有效单体成分。这些研究既拓展了RA发病机制的认识，也为将GMI开发成安全有效的RA治疗药物提供理论基础。

Rheumatoid arthritis (RA) is a chronic autoimmune disease characterized as joint synovitis and persistent synovitis can evoke artilage damage. Extensive literature and our previous studies have shown that CD147 play important regulatory role for generating matrix metalloproteinases (MMPs) which is the key mediator of cartilage damage in RA. The extracts from Gentiana macrophylla Pall.(GMI) can improve the RA symptoms and protect RA cartilage damage, but its mechanism and active component are not fully understood. We found that highly glycosylated CD147 (HG-CD147) increased in RA synovial cell (FLS), and the abnormal secretion of MMPs related to high expression of glycosylation transferase (GnT-V) of CD147. On the other hand, GMI can inhibited the highly expression of GnT-V and HG-CD147 in RA FLS and reduced the level of MMPs in RA. On the basis of our previous research, we propose to: (1)Investigate treatment effect of GMI in RA symptoms and cartilage injury through building severe combined immunodeficient mice-human RA grafts (SCID-HuRAg) model; (2)Clarify the specific molecular mechanism of modulation of MMPs production through CD147/p38/NF-κB signal pathway mediated by GMI; (3)Explore the effective monomer component in the treatment of RA. These studies help expand understanding of the pathogensis of RA, which is expected to open up new ideas to explore novel treatment strategy and provide a theoretical foundation of GMI as a safe and effective drug for the treatment of RA.

类风湿关节炎（RA）是一种以关节滑膜炎为特征改变的慢性自身免疫疾病，滑膜炎持久反复发作引起关节软骨破坏。秦艽为临床治疗RA的传统药物，但其提取物环烯醚萜类成分（GMI）用于改善RA症状及软骨损伤的作用机制尚不明确。本项目主要基于RA发病的关键分子CD147探讨GMI治疗类风湿关节炎软骨损伤的作用机制。研究内容分为四部分：①考察GMI对RA症状及软骨破坏的治疗效果。②通过体外细胞实验研究GMI对CD147糖基化的作用。③阐明GMI通过CD147/p38/NF-κB信号通路调节MMPs生成的作用机制。④筛选GMI中抗RA 软骨损伤的有效单体成分。本研究利用了多种生物学技术，包括基因转染、基因过表达技术、流式细胞术、免疫组化、western blot、免疫荧光、HE染色、Micro-CT等。研究通过建立类风湿关节炎小鼠模型，证实GMI在体内改善RA病理症状及抗RA软骨损伤的作用，可降低RA小鼠踝关节肿胀程度、关节炎指数、胸腺指数和脾脏指数；筛选出了GMI中有效单体成分龙胆苦苷GEN；通过体内和体外实验验证了GEN可抑制HG-CD147、p-p38、p-IκBα、p-p65以及下游分子MMP1、MMP2、MMP3的含量，阐明了GMI及其有效成分GEN通过CD147/p38/NF-κB信号通路调节MMPs的生成来发挥抗RA软骨损伤的作用机制。通过本课题的系统研究，从CD147/p38/NF-κB这一全新角度进一步阐明RA发病机制，为寻找新的治疗策略提供依据，深入探讨GMI改善RA病理症状的作用及机制，并筛选出GMI中抗RA软骨损伤的有效单体成分，使我们对GMI这一天然药用成分有一全新的认识，为将GMI自主开发成为疗效确切、安全经济的RA临床治疗药物奠定理论基础。