独活是中医传统用药，临床常用其祛风湿作用，香豆素类化合物是其主要成份。近年来发现独活具有改善学习记忆损伤、延缓脑衰老和防治阿尔茨海默病等作用，但香豆素成分在脑核团内的分布及与脑部作用的相关性研究未系统开展。. 本项目提出假设：独活香豆素经口服吸收进入体内，在血浆和脑核团中达到一定浓度才能发挥抗记忆损伤作用。基于此假设，本项目首先采用血脑屏障体外MDR1-MDCK单层细胞模型，鉴定独活提取物中能够透过血脑屏障的香豆素类成分，并测定主要香豆素成分的透过吸收能力；其次全面鉴定大鼠灌胃后吸收入血及分布在脑脊液和脑核团中的独活香豆素类成分，并对主要成份在血浆和脑核团中的药代动力学进行监测；同时配合在脑内暴露的主要成份的乙酰胆碱酯酶抑制作用、神经细胞损伤保护作用以及Aβ42聚集抑制作用等活性测试，阐明独活抗记忆损伤的药效物质基础及其体内过程。

The root of Angelica pubescens Maxim. f. biserrata Shan et Yuan (Du-huo) is widely used in clinics for its anti-rheumatism effect. Coumarins are major bioactive constituents in Du-huo. It has been proved for mitigating amnesia, delaying brain aging and treating Alzheimer's disease (AD) in recent years. But the distributions in cerebral nuclei and the relevance with brain function of coumarins have rarely reported.. The project raises the hypothesis that coumarins of Du-huo should get into circulation after they could exert the therapeutic roles. Based on the hypothesis, the present project will conduct the following studies: (1) study the BBB permeability of coumarins using in vitro MDR1-MDCK monolayer model; (2) identify the coumarins in plasma, cerebro-spinal fluid (CSF) and cerebral nuclei after oral administration of Du-huo extract; (3) evaluate the acetylcholinesterase (AChE) inhibitory activity, neural cell protective activity and Aβ42 aggregation inhibitory effects of major coumarins, and monitor their pharmacokinetics in plasma, CSF and cerebral nuclei. Through the above studies, this project aims to elucidate the anti-amnesia components of Du-huo and their in vivo process.

独活是中医传统用药，临床常用其祛风湿作用，近年来发现独活具有改善学习记忆损伤、延缓脑衰老和防治阿尔茨海默病等作用。香豆素类化合物是独活的 主要成份，本项目研究了独活香豆素成分的体内、体外肠吸收、脑吸收以及体外神经保护和抗炎作用。体外跨Caco-2细胞单层转运实验结果显示独活香豆素均为良好或中等肠吸收。体内药代动力学结果显示，香豆素类成分均能迅速吸收入血并在呈现明显的双峰吸收，达峰时间及半衰期均小于6h，在口服给药24h后基本消除完全。独活香豆素中含量最高的二氢欧山芹醇当归酸酯在体内分布很低；而二氢欧山芹素在血液中的分布极高，与二氢欧山芹醇醋酸酯和二氢欧山芹醇当归酸酯在口服后的迅速代谢有关。体外跨MDCK-pHaMDR细胞单层转运实验结果显示独活香豆素均为良好或中等跨血脑屏障吸收。体内脑组织和脑脊液分布结果显示，大部分香豆素成分能迅速吸收进入脑脊液和脑组织，其分布也呈现双峰现象，与血液药代动力学分布曲线趋势相同，二氢欧山芹素在脑脊液和脑组织中分布极高。独活香豆素中含量最高的二氢欧山芹醇当归酸酯在脑组织内消除迅速，在脑脊液中未有检出。与血浆中的分布量相比，补骨脂素、二氢欧山芹醇醋酸酯、当归醇B、紫花前胡内酯在脑脊液中的总量百分比大于1%，大部分化合物在脑组织中的总量百分比大于10%，其中补骨脂素和二氢欧山芹醇醋酸酯在脑脊液和脑组织中的总量百分比均最高，说明这两个化合物的脑吸收能力最强。体外活性实验结果显示，大部分香豆素成分对MPP+和H2O2诱导的PC12细胞损伤具有很好的保护作用，以二氢欧山芹醇当归酸酯、蛇床子素和阿彼斯基姆素的作用尤其明显。大部分香豆素成分均可明显降低LPS诱导的BV2细胞的IL-6和TNF-α水平，其中二氢欧山芹素和二氢欧山芹醇醋酸酯等9个化合物的炎症因子抑制作用甚至优于阳性对照药。综上所述，独活香豆素成分能快速吸收入血并分布至脑组织和脑脊液，含量较高的化合物的神经保护和抗神经炎症作用明显，基本阐明独活脑部作用的物质基础。