胰岛素抵抗（IR）是肥胖和2型糖尿病的重要诱因，探讨IR发生的分子调控机制意义重大。已有研究显示转录因子Twist 1与IR关系密切，但其影响IR的分子机制仍知之甚少。且有学者证实转录因子PPARγ与IR有重要联系，并影响脂肪细胞因子的分泌。申请者发现Twist 1和PPARγ在脂肪细胞IR模型中均表达上调，且Twist 1影响PPARγ的表达及葡萄糖的摄取，同时影响部分脂肪细胞因子的分泌。以上结果支持Twist 1可能通过影响PPARγ介导的脂肪细胞因子分泌进而影响IR的发生。本课题将建立脂肪细胞IR模型，探讨Twist 1与PPARγ及胰岛素敏感性之间的分子调控关系，综合分析Twist 1在PPARγ介导的脂肪细胞胰岛素抵抗中的作用及机制。本课题的研究成果将为脂肪细胞IR的发生机制提供新的靶点。

Insulin resistance (IR) is the major cause of obesity and type 2 diabetes (T2DM)，and it is of great significance to explore the moleculor mechanism of IR occurrence. Literatures showed that Twist 1, as a transcriptional factor, was closely related with IR, but largely keeps unknown about the molecular mechanism of Twist 1 in IR. Also, some studies have confirmed the critical role of PPARγ in the occurrence of IR and adipokine secretions. Our previous study showed the up-regulations of Twist 1 and PPARγ in occurrence of IR based on cultured adipocytes. Also, we found the expression of PPARγ, uptake of glucose, and the secretion of adipokines could be influenced by Twist 1. These results suggest that the effect of Twist 1 to IR of adipocytes may be related with the secretion of adipokines mediated by PPARγ. In this study, we are aimed to explore the molecular regulation relations between Twist 1, PPARγ, and adipocytes insulin resistance. Models of IR based on cultured adipocytes and conditional Twist 1 gene knockout and knock-in mice will be established to analyze comprehensively the role and mechanism of Twist 1 in IR mediated by PPARγ. The research of this study is expected to show new molecular mechanism and provide novel targets to IR.

胰岛素抵抗（IR）是肥胖、2型糖尿病等多种慢性代谢性疾病的重要诱因，探讨IR的分子调控机制意义重大。已有研究显示转录因子Twist 1 和IR 关系密切，但其影响脂肪细胞胰岛素敏感性的分子机制仍知之甚少。且有研究证实转录因子PPARγ是IR发生发展重要调控因子之一，并影响脂肪细胞因子的分泌。但是，有关Twist 1和PPARγ之间的分子调控关系，以及Twist 1对PPARγ介导的IR影响报道甚少。本研究通过体外脂肪前体细胞诱导分化实验，探讨脂肪细胞中转录因子Twist 1与PPARγ之间的分子调控关系；并通过高糖/高胰岛素溶液诱导建立脂肪细胞的IR模型，检测Twist 1和PPARγ在IR中的表达变化，以及Twist 1在PPARγ介导的IR中的分子调控机制。具体研究结果如下：（1） 体外诱导分化3T3-L1脂肪前体细胞，发现随着诱导分化时间的延长，Twist 1和PPARγ表达明显上调。（2） 借助慢病毒载体干扰脂肪细胞Twist 1基因，发现PPARγ表达显著下调。进一步证实在PPARγ激动剂吡格列酮作用下转录因子Twist 1表达上调，PPARγ抑制剂T0070907作用下3T3-L1脂肪细胞中Twist 1的表达下调。（3） 高糖/高胰岛素溶液建立IR模型，检测到Twist 1和PPARγ在IR组表达上升。通过葡萄糖消耗、葡萄糖摄取和GLUT 4荧光染色发现干扰Twist 1可改善IR程度。（4） 证实干扰Twist 1基因提高胰岛素敏感性时，脂肪细胞因子的分泌发生改变，胰岛素信号通路分子p-IRS、p-PI3K、p-AKT水平升高，但是p-ERK无明显差异。综上所述可知，Twist 1和PPARγ在3T3-L1脂肪细胞中存在正向调控关系。干扰Twist 1表达使得PPARγ介导的脂肪细胞因子分泌功能发生改变，胰岛素信号通路相关分子p-IRS、p-PI3K、p-AKT表达升高，进而提高脂肪细胞胰岛素敏感性。本研究从Twist 1基因这个新视点揭示脂肪细胞功能异常的分子机制，尤其围绕脂肪细胞分泌异常、脂肪细胞胰岛素抵抗等过程展开，明确了Twist 1与PPARγ之间的分子调控关系、明确Twist 1影响PPARγ介导的脂肪细胞因子分泌功能、胰岛素信号通路。本课题的研究成果有望成为Twist 1基因影响脂肪细胞功能和脂肪细胞胰岛素抵抗的新思路。