脉络膜新生血管（CNV）最常见于AMD 和病理性近视,至今尚无有效的治愈方法。病灶的纤维化是影响CNV预后的关键，而在CNV纤维化过程中，内皮细胞间质化（Endo-MT）起着重要的作用。我们在研究CXCR7分子促进内皮细胞间质化（Endo-MT）参与CNV纤维化过程中，同时发现CXCR7分子可以调节内皮细胞自噬来影响病灶的纤维化。本研究拟以小鼠骨髓内皮细胞ECs、RF/6A细胞以及CNV动物模型为研究对象，进一步研究SDF-1/CXCR7/STAT3信号通路对自噬小体形成及功能的影响，及其对Endo-MT中重要信号通路Smad2/3及转录因子Snail的调控。本研究不仅有利于阐明SDF-1/CXCR7信号通路在调节内皮细胞自噬及Endo-MT中的作用，而且将为研发以CXCR7分子为靶点的抗CNV纤维化新药奠定理论基础。

Choroidal neovascularization (CNV) is most common in age related macular degeneration (AMD) and pathologic myopia ,which has no effective cure yet. The main factor influencing the prognosis of the CNV is the formation of the fibrosis, which the endothelial-to-mesenchymal transition (Endo-MT) plays a critical role. We find out that CXCR7 could affect the fibrosis progress by regulating autophagy when we were studying the effect of CXCR7 on Endo-MT. In this project , we want to continuously explore the effect of SDF-1/CXCR7/STAT3 on formation and function of the autophagosome and the regulation to Smad2/3 and Snail which are important signaling pathway and transcription factor respectively by using RF/6A cells and animal model of CNV. Our study not only illuminating the relationship among SDF-1/CXCR7,autophagy and Endo-MT, but also establishing a theoretical basis of developing new drugs targeting CXCR7 to prevent the fibrosis in CNV.

脉络膜新生血管（choroidal neovascularization，CNV）最常见于AMD和病理性近视，目前主要治疗方法为针对新生血管的抗VEGF治疗，然而CNV后期纤维化往往制约其疗效，造成视力不可逆的损害。在前期国家自然科学基金面上项目（81470637）的研究基础上，我们证实SDF-1/CXCR7信号轴与脉络膜内皮细胞间质化（EndoMT）及纤维化密切相关。但是其中的具体机制尚不明确。为此，本课题主要集中研究SDF-1/CXCR7信号轴通过自噬调控脉络膜内皮细胞间质化。Western blotting和免疫荧光结果表明：SDF-1/CXCR7可通过抑制mTOR下游p70s6k的磷酸化，从而抑制自噬相关蛋白LC3II和ATG7的积聚和表达。我们考虑SDF-1/CXCR7信号轴引起的自噬水平改变可在一定程度上调控脉络膜内皮细胞间质化水平。因此，我们主要集中于自噬调控脉络膜内皮细胞EndoMT的作用及其分子机制。我们采用TGF- β2诱导内皮细胞间质化的细胞模型，通过迁移实验，首先检测了自噬在TGF-β2迁移能力的作用，通过Western blot、Real-time PCR等考察了自噬在EndoMT中的作用，并通过免疫荧光、免疫共沉淀、Western blot和Real-time PCR阐明了自噬抑制TGF-β2诱导hRMECs细胞发生EndoMT的部分机制。结果显示：自噬能够抑制TGF-β2诱导的迁移能力，自噬抑制能够促进TGF-β2诱导的EndoMT的发生，自噬促进亦能抑制TGF-β2诱导的EndoMT。自噬发挥上述生物学功能的机制是通过降低TGF-β2下游Smad3信号通路的磷酸化水平，从而降低转录因子Snail的表达，抑制EndoMT过程。综合上述结果，本研究不仅初步探索了SDF-1/CXCR7信号轴对自噬的作用及机制，而且更深入研究了自噬水平的变化对于脉络膜内皮细胞EndoMT的调控作用及其分子机制。本项目的成果将为研发基于CXCR7为分子靶点的CNV治疗新药提供新思路并积累治疗，以期提高临床抗VEGF治疗疗效，具有重要的临床意义。