流行病学调查显示，化疗相关性疲劳严重影响患者的生存质量，然而目前对它的发生机制知之甚少，临床上也缺乏公认的治疗药物。前期研究发现化疗相关性疲劳存在能量代谢紊乱导致骨骼肌损伤，但具体机制不清。我们推测化疗药物有可能是通过调控与能量代谢相关的mTOR、AMPK信号通路，诱导骨骼肌细胞自噬的发生，导致化疗相关性疲劳的产生。本项目拟在前期研究的基础上，以化疗相关性疲劳小鼠动物模型和骨骼肌细胞为研究对象，利用透视电镜、实时定量RT-PCR、Western blot等技术方法，检测细胞自噬表达水平、mTOR、AMPK相关通路信号分子的表达和活性，明确化疗相关性疲劳发生的分子机制。同时观察中药益气除痰方对骨骼肌细胞自噬mTOR、AMPK相关通路的影响，采用基因过表达、siRNA 等技术消除益气除痰方对这些阳性通路的影响，观察益气除痰方对骨骼肌细胞自噬的调节作用的变化情况，以明确益气除痰方作用的靶点。

The chemotherapy-related fatigue affects the people with cancer and the survives seriously. The clinical prevention and treatment is difficult for the reason of the mechanism about it is not clear. Our previous research showed that the chemotherapy-related fatigue model showed abnormal structure and dysfunction of skeletal muscle,we also found that through regulating downstream mTOR and AMPK pathway could enhance autophagy level and affect skeletal muscle function. In this study,we will detect the expression level of autophagy and the mTOR, AMPK signal pathway via electron microscopic perspective, a real-time quantitative RT-PCR, Western blot and other technical methods, definite the mechanism of the chemotherapy-related fatigue.Then eliminate the effect of the traditional Chinese medicine yiqi Chu Tan prescription on skeletal muscle cell autophagy and the mTOR, AMPK pathway via the gene expression, siRNA technology, observe if there have any change in the regulation of skeletal muscle cells autophagy, to make clear the targets of Yi Qi ChuTan prescription.

目的：至今尚未阐明化疗相关性疲劳发生的机制，为其防治带来困难。因此，如何防治化疗相关性疲劳是目前亟待解决的重要课题之一。本研究抓住化疗相关性疲劳研究中的关键问题，从细胞自噬的角度对化疗相关性疲劳发生的分子机制及益气除痰方的作用机制进行探讨。方法：本研究分为体内研究和体外研究两部分。体内动物实验部分通过建立肺腺癌移植瘤裸鼠模型以及化疗相关性疲劳裸鼠模型，应用益气除痰方进行干预，观察各组的一般情况、力竭游泳时间、血液相关指标、肿瘤体积大小、生存时间等相关指标，明确益气除痰方对化疗相关性疲劳的药理作用。并对各组骨骼肌形态学、骨骼肌氧化还原情况、电镜下自噬小体形成情况、骨骼肌自噬相关蛋白表达、骨骼肌线粒体自噬相关蛋白表达、AMPK/mTOR信号通路相关蛋白表达等指标进行检测，为验证体内实验的研究结果，我们还进行了体外细胞分子学实验，通过建立骨骼肌细胞体外损伤模型，并通过应用自噬抑制剂3-MA、益气除痰方进行干预，比较各组骨骼肌细胞自噬及通路信号分子表达和活性的影响，从细胞分子学的角度来明确化疗相关性疲劳发生的分子机制以及益气除痰方的作用机制。结果：①通过对荷瘤模型及化疗相关性疲劳模型力竭游泳时间进行检测，发现肿瘤本身及化疗药物顺铂均能引起荷瘤裸鼠游泳时间缩短，证明疲劳模型成立，且由顺铂所引起的化疗相关性疲劳较肿瘤本身引起的疲乏，出现得更早，程度更严重。②明确了化疗相关性疲劳产生的机制之一是化疗药物通过对骨骼肌细胞造成毒性伤害，促进其发生氧化应激反应，导致过氧化产物在骨骼肌细胞中的堆积，从而激活AMPK/Raptor/mTOR信号通路，诱导骨骼肌细胞线粒体自噬的过度发生，最终导致化疗相关性疲劳的产生。③益气除痰方可以通过改善氧化应激反应，抑制骨骼肌细胞过度自噬而发挥防治化疗相关性疲劳的作用。益气除痰方还具有改善荷瘤裸鼠的一般状况、生存质量、抑瘤增敏、调节免疫功能等作用。结论：①化疗相关性疲劳产生的机制之一是化疗药物通过对骨骼肌细胞造成毒性伤害，促进其发生氧化应激反应，导致过氧化产物在骨骼肌细胞中的堆积，从而激活AMPK/Raptor/mTOR信号通路，诱导骨骼肌细胞线粒体自噬的过度活化，最终导致化疗相关性疲劳的产生。②益气除痰方可以通过改善氧化应激反应，抑制骨骼肌细胞过度自噬而发挥防治化疗相关性疲劳的作用。