脓毒症是ICU患者死亡的主要原因之一。内毒素耐受在脓毒症及继发二次感染中起关键作用，但有关内毒素耐受的机制仍不清楚。我们前期研究发现，内毒素耐受的巨噬细胞对内毒素信号转导反应良好但不产生炎症因子，提示内毒素耐受与细胞内在的不产生炎症因子的机制有关；采用表达谱芯片发现脓毒症患者IRG1表达量明显上调，但是否与脓毒症及继发二次感染相关仍待研究验证。在此基础上，本申请拟研究IRG1参与脓毒症内毒素耐受的效应与机制。通过收集脓毒症及继发二次感染患者外周血大样本，研究IRG1表达与脓毒症病情和预后的相关性；通过构建IRG1缺陷小鼠、脓毒症动物模型和内毒素耐受巨噬细胞模型，观察生存率、脏器损伤、炎性因子产生等体内效应；以过表达或干扰IRG1后检测信号通路和炎性因子产生、IP后质谱检测IRG1相互作用分子、基因组甲基化测序等手段，发现IRG1调控内毒素耐受形成的作用和分子机制，为临床治疗脓毒症提供新思路

Sepsis is a major cause of death in Intensive Care Unit. Endotoxin tolerance is a critical factor for second infection of patients with sepsis or chronic infection. It remains not well illuminated in international immunology research. Most of previous research still focused on negative regulation of innate immunity. Our primary data showed that signal transduction still remain responsive, while pro-inflammatory cytokines almost is not induced.This result indicates that the major mechanism of endotoxin tolerance may result from the "not produce". We previously found that IRG1(immune responsive gene 1) might promote endotoxin tolerance by up-regulating A20 through ROS production. We plan to explore the phenonenea and mechanism of epigenetic modification in endotoxin toerance, the effection and molecular mechcanism of IRG1 in endotoxin tolerance. Our research will provides new clues to clinical therapy of sepsis and second infection.

脓毒症相关免疫抑制（SAIS），是导致脓毒血症患者晚期因免疫功能低下而死亡的主要原因。内毒素耐受的巨噬细胞，即两次LPS刺激巨噬细胞，是模拟SAIS的常用细胞模型。内毒素耐受和SAIS发生的分子机制上不完全清楚。TLR触发的天然免疫应答的负向调控机制也需进一步研究。我们研究发现，脓毒症患者外周血单核细胞中IRG1表达量上调。在内毒素耐受的巨噬细胞，IRG1能够通过增加ROS和A20的表达量，抑制TLR触发的炎性细胞因子TNF-α、 IL-6和IFN-β的产量。此外，ROS能够通过增加A20启动子区域H3K4me3组蛋白修饰增加A20的表达。补充ROS能够通过增加A20的表达，逆转因IRG1基因敲减导致的内毒素耐受消失。我们的研究结果显示，IRG1能够通过增加ROS的产量上调A20的表达，进而促进内毒素耐受的发生，为研究脓毒症和内毒素耐受提供了一条新的分子机制。