中文摘要
从泰山白首乌根中分离到一种结构全新的二苯酮类天然化合物泰山白首乌乙素(BCB)。实验证明其对耐药性结核菌2314-2#菌株最小抑制浓度为32μg/ml,同时该植物苯酮类乙醇粗提物具有抗HIV-1RT活性作用。本课题拟建立HIV-1转基因小鼠感染耐多药性结核菌模型,给药BCB后,采用FCM、ELISPOT等方法检测小鼠外周血VγVδ2+、CD4+、CD8+、CD4+CD25+T细胞比例,细胞因子(IL-2、IFNγ、IL-12,TNF-α,TNF-β,Foxp3)表达,检测脏器HIV-1病毒蛋白gp120、Foxp3表达及T细胞亚群比例。分析Foxp3对CD4+CD25+T细胞活性的作用,及CD4+CD25+T细胞与Vγ2Vδ2+T细胞的相互调节作用,深入探讨该模型免疫机制及药物干预机制,寻找药物作用靶点,为"扶正"中药泰山白首乌的免疫机制提供新的中药药理基础资料。
英文摘要
New natural products BCB kinds of Benzophenone were extracted from Cynanchum bungei Decne. In vitro study showed BCB had MIC up to 32μg/ml for Tubercle bacillus 2314-2 which is a drug-resistant strain induced by isoniazid and rifampicin. Meanwhile the raw ethanol extracts showed upstanding anti HIV-1RT activity. In this project, we will establish a MDR-TB mice model of HIV-1 Transgenic(HIV-1), detect peripheral blood VγVδ2+、CD4+、CD25+T and molecular expression of Foxp3, further research and elucidate the activity and mechanism of BCB anti MDR-TB,HIV-1 RT. The study will reveal the bi-inhibition rule of benzophenone for MDR-TB/HIV, resolve MDR-TB and AIDS, two global tough problems. It will fill up the new molecular bank, offer a new path for chinese medicine anti hybrid infection caused by MDR-TB/HIV, provide the new basic files of Chinese medicine pharmacology for the "Fuzheng"Chinese medicine immunologic mechanism of C.bungei Decne.
结题摘要
1、硅胶柱色谱结合高速逆流色谱法分离制备白首乌根皮中的苯乙酮类成分.创建硅胶柱色谱结合高速逆流色谱法制备分离泰山白首乌根皮中苯乙酮类成分的方法。 方法:白首乌根皮粗提物先经过硅胶柱色谱进行初步分离,得到含有苯乙酮类成分的A和B两个组分,分别采用石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(4∶6∶4.5∶5.5,V/V)和石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(4∶6∶3∶7,V/V)的两相溶剂体系进行制备并分离。 结果:从260 mg组分A中分离制备得到对苯二酚3.9 mg(1)、4-羟基苯乙酮17.1 mg(2)、 2,5-二羟基苯乙酮1.3 mg(3) 和2,4-二羟基苯乙酮21.0 mg(4);从300 mg组分B中分离得到白首乌二苯酮136mg(5)。经高效液相色谱分析,其纯度分别为97.0%、96.6%、99.2%、99.7%、99.5%。 结论:该法简便、快速、高效,可用于白首乌根皮中苯乙酮类成分的快速分离制备,有较好的实用价值,为白首乌的开发利用提供了参考依据。2、对已经分离到的白首乌二苯酮化合物纯品白首乌乙素进行了抗结核体外实验,证明有抗结核作用。但由于原计划由马里兰大学动物中心提供的HIV-1转基因小鼠没能提供,导致无法按照原计划开展下一步实验。已申请中止。
