在课题组前期发现KLF4通过与p300相互作用介导组蛋白乙酰化修饰的基础上，结合国外相关研究结果，提出KLF4是一种表观遗传调控因子的新观点。KLF4依据胞外刺激信号及其所激活的信号转导途径不同，通过蛋白质-蛋白质相互作用，选择性地将p300或HDAC募集到VSMC特异性基因启动子周围的染色质上，被募集到特定位点上的p300或HDAC既发挥对组蛋白乙酰化/脱乙酰基修饰以及对染色质结构的调节作用；又借助其对KLF4的乙酰化/脱乙酰基修饰，调节KLF4与VSMC特异性基因启动子的结合活性和反式激活作用，实现对VSMC基因表达及细胞表型的调节。本项目利用研究蛋白质-蛋白质相互作用、组蛋白修饰与染色质结构分析、细胞表型检测等实验技术，研究KLF4在染色质结构重塑和VSMC特异性基因表达及表型调制中的作用及机制，证实KLF4是一种新的表观遗传调控因子。

KLF4作为一种多能转录因子，在VSMC染色质重塑和表型调制中发挥重要作用。本项目用维甲酸（ATRA）、TGFβ和PDGF诱导VSMC表型转化，研究VSMC标志基因激活或阻抑与KLF4和组蛋白乙酰化/脱乙酰基修饰之间的关系，探讨VSMC表型转化的表观遗传学调控机制。取得下述研究成果：第一， ATRA通过激活JNK和p38信号诱导KLF4磷酸化及KLF4与p300相互作用，KLF4被p300乙酰化后增加与VSMC分化基因启动子的结合活性，促进VSMC分化。PDGF通过激活ERK和PI3K/Akt信号诱导KLF4脱磷酸及KLF4与HDAC2结合，促进KLF4脱乙酰基，使VSMC分化基因表达受阻。首次证实，KLF4以乙酰化/脱乙酰基依赖的方式，通过与VSMC分化基因启动子的结合或解离，对VSMC表型发挥不同的调节作用。第二，TGF-β1通过激活PKC-δ信号诱导KLF4苏氨酸残基磷酸化，促进Sp1与KLF4解离；通过激活Smad信号通路诱导KLF4丝氨酸残基磷酸化，促进KLF4与PPAR-γ相互作用；Sp1促进KLF4对AT1R基因的激活，PPAR-γ抑制KLF4对AT1R基因的激活，结果因TGF-β1诱导的KLF4、Sp1和PPAR-γ在AT1R启动子上的装配改变而导致AT1R基因阻抑及VSMC增殖受阻。第三，KLF4、Sp1和YB1均可与Klf4启动子近端的GC盒结合，在未经ATRA处理的VSMC中，KLF4、Sp1和YB1形成复合物， ATRA处理促进RARα与KLF4-Sp1-YB1复合物结合，ATRA通过促进RARα与KLF4-Sp1-YB1复合物相互作用而调节KLF4基因表达。miR-146a和KLF4以反馈回路的方式参与VSMC表型的调节。