中文摘要
丙型肝炎病毒（HCV）感染后极易慢性化和发展为肝硬化及肝癌，迄今尚无预防疫苗。HCV预防疫苗的发展一直受包膜糖蛋白高度变异、缺乏体外培养细胞模型、小动物模型及没有可靠的中和抗体评价方法等的限制。本课题在以往HCV多表位抗原基因重组BCG诱导的体液免疫应答研究和HCVpp初步建立的基础上，结合HCV中和抗原表位研究进展，选择保守的中和表位，单独或串联后分别嵌合于HBV S抗原亲水区，制备嵌合HCV中和抗原表位的HBV S抗原病毒样颗粒（VLPs）。获得多种纯化的VLPs，分别与HCV感染患者血清进行反应，分析其交叉中和活性；用纯化的VLPs免疫小鼠，观察免疫小鼠血清对HCVpp及HCVcc感染Huh-7.5细胞的抑制作用；观察不同组合的VLPs免疫小鼠诱导的中和抗体应答情况。该研究结果可为HCV预防性疫苗的发展提供新的思路和可靠的实验依据。
结题摘要
丙型肝炎病毒（HCV）感染后极易慢性化和发展为肝硬化及肝癌，迄今尚无预防疫苗。发展HCV预防疫苗迫切需要。本课题选择保守的中和表位，单独或串联后分别嵌合于HBV S抗原亲水区，制备嵌合HCV中和抗原表位的HBV S抗原病毒样颗粒（VLPs）。结果获得四种单一表位嵌合的VLPs，串联组合表位未能包装出VLPs。纯化的VLPs与HCV感染患者血清进行反应，结果发现HCV RNA阳性患者血清中有一定水平的中和抗体存在；用纯化的VLPs免疫小鼠，测定小鼠体内产生的不同表位的中和抗体，结果在小鼠体内产生一定水平的中和抗体，VLPs联合免疫组中和抗体水平高于单一表位嵌合VLPs免疫组。观察免疫小鼠血清对HCVpp及HCVcc感染Huh-7.5细胞的抑制作用，结果表明小鼠体内产生的中和抗体能抑制1a,1b和2a三个型别的HCVpp和HCVcc对Huh-7.5感染。研究结果表明嵌合HCV中和表位抗原的VLPs能诱导产生具有保护作用的中和抗体，该实验结果为发展HCV预防性嵌合VLPs疫苗提供实验依据。该课题对研发HCV预防疫苗有较好的指导意义。课题已发表相关论文，申请了专利。