中文摘要
通过4种插入位置不同、基因表达也不同的转绿色荧光蛋白(gfp)基因大麦间的相互杂交进行染色体重组,明确半杂合转基因在不同重组个体染色体组成中的表达特征,利用荧光原位杂交技术(FISH)鉴定F2单株的转基因所在染色体组成,比较不同转基因染色体组成和基因表达的对应关系,从而明确转基因经染色体重组后对基因表达的位置效应,研究同一基因在不同染色体组成中的相互作用时对性状表达的影响。通过染色体的重组将不同染色体上的转基因进行聚合,对聚合个体的转基因表达进行研究,回答转基因沉默与基因拷贝数的关系。在此研究的基础上为转基因植株的继续应用提供技术依据,现代生物技术和传统育种方法结合,对合理利用各类基因表达不同的转基因植株具有实践指导价值。
结题摘要
以转绿色荧光蛋白(gfp)基因大麦为材料研究了转基因表达的位置效应、转基因遗传及转基因座位结构。5个转化系的gfp插入不同染色体或相同染色体不同区段,转基因插入是随机的。5个转化系在根尖和花粉中表达GFP具有不同强度,D系表现转基因沉默,表明转基因表达存在位置效应。 插入2条染色体和四倍体的转化系其GFP表达强度大于1条染色体插入及二倍体而表现剂量效应。单位点和双位点插入的转化系与野生型大麦杂交的F2根尖分别表现3:1和15:1的分离,转基因以孟德尔式稳定遗传。不同转化系间杂交后代中出现高表达的个体,表明通过转基因染色体重组将有利于提高转基因的表达。 A,C,D,F转化系的转基因座位分析显示均有完整载体的串联重复,同时也存在不完整载体片段、基因组片段的混杂排列,说明微粒轰击的转基因整合是由异常重组和同源重组完成的,转基因的完整性对基因表达具有相关性。本研究对了解转基因表达、转基因座位结构、转基因整合机制具有重要意义,为现代生物技术与传统育种相结合提供了理论依据。
