中文摘要
真菌提取物，特别是细胞壁多糖寡糖组分，能够有效诱导红豆杉中抗癌次生代谢物紫杉醇的超量合成，但相关分子机理未见报道。本研究首先从红豆杉材料及其周边环境中分离真菌，纯化真菌中能有效诱导红豆杉细胞中紫杉醇大量合成的组分；然后采用表达芯片等技术研究目前已经报道的20多个紫杉醇合成基因在真菌多糖胁迫下的表达模式，找到的差异表达基因，进而克隆其上游启动子序列；再通过生物信息学方法寻找其中共有的顺式调控序列；最后利用酵母单杂交的方法，确定能与该序列特异性结合的转录因子，结合信号转导的相关研究，阐明红豆杉细胞在真菌诱导下紫杉醇合成酶基因表达水平的变化模式与原因，从而全面了解真菌诱导红豆杉中紫杉醇大量合成的分子机制。该研究可以为了解红豆杉中紫杉醇合成调控机制，开发更有效的诱导子，解决紫杉醇药源匮乏问题提供理论指导。
结题摘要
真菌提取物，特别是细胞壁多糖寡糖组分，能够有效诱导红豆杉中抗癌次生代谢物紫杉醇的超量合成，但相关分子机理未见报道。本研究首先从红豆杉材料及其周边环境中分离真菌，纯化真菌中能有效诱导红豆杉细胞中紫杉醇大量合成的组分；然后采用表达芯片等技术研究目前已经报道的20多个紫杉醇合成基因在真菌多糖胁迫下的表达模式，找到的差异表达基因，进而克隆其上游启动子序列；再通过生物信息学方法寻找其中共有的顺式调控序列；最后利用酵母单杂交的方法，确定能与该序列特异性结合的转录因子，结合信号转导的相关研究，阐明红豆杉细胞在真菌诱导下紫杉醇合成酶基因表达水平的变化模式与原因，从而全面了解真菌诱导红豆杉中紫杉醇大量合成的分子机制。该研究可以为了解红豆杉中紫杉醇合成调控机制，开发更有效的诱导子，解决紫杉醇药源匮乏问题提供理论指导。