中文摘要
伤害诱导分析表明,属于同一亚组拟南芥3个WRKY基因主要在植物输道组织中诱导表达,并受植物激素ABA诱导表达。突变体抗病毒分析表明,该亚组WRKY基因通过强烈抑制β-1,3-葡聚糖酶基因表达而在调控病毒运输方面具有十分重要的生物学功能。在上述研究工作的基础上,将采用一系列分子生物学、基因功能和遗传分析等研究方法和技术,系统地研究植物激素ABA调控植物抵抗病毒侵染的分子生物学机制及其信号转导途径,将详细阐明一组受植物激素ABA调控的3个拟南芥WRKY基因调控植物抵抗病毒类病源物侵染,以及参与植物激素ABA诱导植物抗病毒水平提高的信号转导途径等方面的分子生物学功能及其相互作用的分子生物学机制,并明确在植物抵抗病毒侵染方面ABA与几种植物激素(包括SA、JA和ET)抗病信号转导途径相关性以及3个受ABA调控的WRKY基因在上述信号途径之中所处位置。
结题摘要
通过Northern blot分析,我们证实植物激素ABA和SA参与植物抗病毒的正调控,而JA和ET参与植物抗病毒的负调控。利用GUS报告基因染色技术,我们分析了拟南芥WRKY8、WRKY28、 WRKY34、WRKY39、WRKY48和Nodulin-related protein (NRP1)等基因的表达模式。拟南芥WRKY8、WRKY28和拟南芥WRKY48基因突变体抗病毒分析表明,ABA调节的WRKY8、WRKY28和WRKY48等基因正调控植物抵抗病毒TMV-cg侵染。进一步分析表明,ABA调节的WRKY8基因通过负调控植物激素乙烯关键的生物合成酶ACS6基因的表达而调控植物抗病毒水平。另外,通过酵母双元杂交系统,以WRKY8蛋白为诱饵,鉴定出一个能有效与WRKY8蛋白相互作用的ATG8I蛋白,并通过双分子荧光互补技术(BiFC)得到验证。随后分析证实,该蛋白正调控植物抵抗病毒TMV-cg侵染。
