中文摘要
现代药理研究发现,药物发挥作用的一个重要原因是与靶细胞或效应细胞膜上的受体等结合或进入细胞内部,与细胞有结合的成分可能为药物活性成分。因此,本课题拟利用靶细胞提取方法,选取与炎症和风湿病密切相关的内皮细胞和滑膜细胞,将伸筋草各提取部位分别与靶细胞作用,采用高效液相色谱/飞行时间质谱(HPLC-ESI/TOFMS)方法对培养后细胞破碎液中的成分进行分析,确定可与靶细胞和效应细胞结合的成分。在此基础上确定伸筋草抗炎、抗风湿活性成分群提取分离工艺。同时利用上述细胞对所分离的成分进行体外活性评价,分别考察各成分对内皮细胞见黏附分子(ICAM-1、VCAM-1),及对滑膜细胞增殖能力和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)表达的影响。初步明确各成分的抗炎、抗风湿活性及其作用机理,同时利用佐剂性关节炎大鼠模型对其进行体内活性评价。为中药抗风湿新药开发提供新的研究模式和实验基础。
结题摘要
本课题利用靶细胞提取方法,选取与炎症和风湿病密切相关的小鼠单核巨噬细胞株Raw 264.7,将伸筋草各提取部位分别与靶细胞作用,采用高效液相色谱/飞行时间质谱(HPLC-ESI/TOFMS)方法对培养后细胞破碎液中的成分进行分析,确定可与靶细胞和效应细胞结合的成分。从总生物碱提取物中获得9个可结合成分,其中2个分离得到单体。并对可与细胞结合的主要成分之一进行体外活性评价,考察其肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)表达的影响。初步明确其抗炎、抗风湿活性及其作用机理。同时对伸筋草进行了系统分离研究,得到17个单体,已基本确定10个单体结构。为中药抗风湿新药开发提供新的研究模式和实验基础。
