中文摘要
在前期研究得到柴胡总皂苷体内肝毒性的染毒剂量、时间、毒性表现和毒性机制的基础上,运用差异蛋白质组学技术,进行柴胡总皂苷肝毒性"量-时-毒关系"研究,进一步确定剂量安全窗和疗程安全窗,寻找肝毒性发生时差异表达的蛋白质,在蛋白质水平阐述柴胡总皂苷导致肝毒性的"量-时-毒"的生物学变化基础和早期可预警的蛋白标志物;为建立蛋白质水平上的临床早期预警体系提供基础数据。
结题摘要
在获知柴胡总皂苷(T-SS)体内肝毒性染毒剂量、时间、表现、机制基础上,运用8标iTRAQ技术结合2D-LC-MS/MS寻找T-SS肝毒性“量-时-毒”关系中差异表达蛋白质和相关生物学指标,小鼠给T-SS后血GST、LDH于药后12h、TBA于药后4h、CYP450于药后8h均显著性升高;量-毒各剂量血GST、LDH、TBA、CYP450活性均显著性增高,且呈现量-毒关系;病理组织学查见肝细胞玻璃样变、脂肪变性及嗜酸性变等细胞损伤乃至坏死的变化。“时-毒”共鉴定蛋白质1289种, 382种有显著性差异,蛋白质功能注释提示差异蛋白质与细胞调节和能量代谢有关;其中密切相关蛋白质有5个,精氨酸酶和载脂蛋白有可能成为肝毒早期标靶。细胞色素C和b5、肉毒碱存在线粒体内,其差异表达与肝毒性能量损伤机制密切相关。“量-毒” 共鉴定蛋白质1602种, 731种有显著性变化,蛋白质功能注释提示差异蛋白质匹配到32条KEGG通路中,这些通路与神经性病变、能量、氨基酸代谢有关。本研究证实,柴胡T-SS肝毒机制与细胞损伤和能量代谢密切相关,其他差异蛋白质变化与生物靶标之间的相互作用和信息分析有待于深入研究。
