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对铝毒胁迫响应的水稻RCS1基因的功能研究

对铝毒胁迫响应的水稻RCS1基因的功能研究
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  • 批准号:30700052
  • 批准年度: 2007年
  • 学科分类:植物与环境互作(C020406) |
  • 项目负责人:王玉琪
  • 负责人职称:副教授
  • 依托单位:华南农业大学
  • 资助金额:16万元
  • 项目类别:青年科学基金项目
  • 研究期限:2008年01月01日 至 2010年12月31日
  • 中文关键词: 胁迫;水稻;RCS1
  • 英文关键词:暂无数据

项目摘要

中文摘要

植物半胱氨酸合酶(CS)催化半胱氨酸合成的最后一步反应,半胱氨酸除了可以用于蛋白质的合成外,还是一些含硫小分子代谢物(如GSH、MT、PCs等)的前体物,这些小分子含硫代谢物在植物抗金属离子毒害中发挥重要作用。本研究项目以已经克隆的一个水稻细胞质半胱氨酸合酶(RCS1)基因为基础,以已经对它初步的表达分析为依据,对该基因进行进一步的功能分析。构建RCS1基因不同的植物转化载体,转化水稻,检测转基因植株的表型及抗逆性,研究RCS1基因在水稻中过量表达和缺失表达后对水稻抗铝性的影响,并用Northern杂交和 Western Blotting技术对RCS1基因在水稻中的表达特性进行详细的分析。这一研究将有助于我们了解RCS1基因在水稻耐铝性中的作用,以期为培育抗逆作物新品种提供理论依据。

结题摘要

半胱氨酸合酶(CS)催化半胱氨酸合成的最后一步反应,半胱氨酸除了可以用于蛋白质的合成外,还是一些含硫小分子代谢物(如GSH、MTs、PCs等)的前体物,这些小分子含硫代谢物在植物抗金属离子毒害中发挥重要作用。本研究克隆了一个水稻细胞质半胱氨酸合酶基因(RCS1),构建了该基因的原核表达载体,并诱导表达,分离纯化后制备了多克隆抗体,并对其表达特性进行了分析;构建了RCS1基因的上调和下调表达的植物双元表达载体,转化中花11水稻,通过潮霉素筛选和分子检测获得转基因植株,并对其后代进行纯合;用Real-time PCR分析了转基因植株中目的基因RCS1的表达情况,结果显示RCS1在过表达转基因植株中的表达量平均上调了5.45倍多,且半胱氨酸合酶活性平均提高了2.3;在干涉表达的转基因植株中表达量平均下调了67.5%,半胱氨酸合酶活性平均下调了17.2%;进一步的功能分析表明,过量表达RCS1能提高水稻对铝毒和镉胁迫的抗性,而干涉RCS1表达的转基因水稻对铝毒和镉胁迫更加敏感,说明半胱氨酸合酶在水稻抗重金属胁迫中发挥重要作用。

评估说明

    国家自然科学基金项目“对铝毒胁迫响应的水稻RCS1基因的功能研究”发布于爱科学iikx,并永久归类于相关科学基金导航中,仅供广大科研工作者查询、学习、选题参考。国科金是根据国家发展科学技术的方针、政策和规划,以及科学技术发展方向,面向全国资助基础研究和应用研究,发挥着促进我国基础研究源头创新的作用。国科金的真正价值在于它能否为科学进步和社会发展带来积极的影响。

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