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灯盏花CHI基因的克隆、转化及其对灯盏花药用成分的影响

灯盏花CHI基因的克隆、转化及其对灯盏花药用成分的影响
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  • 批准号:30660075
  • 批准年度: 2006年
  • 学科分类:植物分子遗传(C060101) |
  • 项目负责人:张云峰
  • 负责人职称:教授
  • 依托单位:云南师范大学
  • 资助金额:20万元
  • 项目类别:地区科学基金项目
  • 研究期限:2007年01月01日 至 2009年12月31日
  • 中文关键词: 灯盏花;CHI;克隆;药用;成分
  • 英文关键词:breviscpini;;;;flavonoids

项目摘要

中文摘要

灯盏花属菊科飞蓬属植物,其有效成分-类黄酮类的灯盏花乙素,被广泛应用于心血管疾病的治疗。对其合成相关基因的研究,不仅可以加深对有效成分合成代谢途径的了解,同时可通过代谢基因工程,在分子水平进行有效成分的改性、修饰以及高药用成分含量的品种育种。目前国际上对黄酮代谢及其基因克隆非常清楚。CHI基因是黄酮合成代谢的一个控制基因,其部分序列在进化过程中极为保守,而且在表达上与其他几个关键基因有较强的协同作用。本项目拟以矮牵牛CHI基因中的部分保守序列为引物,通过RT-PCR克隆灯盏花的CHI基因,并将其接上高表达启动子后导入灯盏花中,通过该基因的高效表达,希望得到高黄酮含量、高有效药用成分含量的工程植株。同时利用转基因植株研究CHI基因表达与灯盏花有效份的相关性。项目的实施不仅可以确定CHI基因与药用有效成分的相关性,而且有望得到高含量的工程株,为下一步的研究及生产奠定基础。

结题摘要

药用植物-灯盏花的有效成分为以灯盏乙素为主的黄酮类物质,通过对其与黄酮代谢途径中间产物的结构比较,灯盏乙素的合成途径可能是查尔酮经CHI转化为槲皮素,槲皮素经IFS转化黄酮醇,黄酮醇经FS转化为野黄芩苷,再经UBGAT而形成。因此,提高CHI代谢产物,有可能会提高灯盏乙素的含量。项目以野生灯盏花为材料,通过RT-PCR和RACE技术,克隆、鉴定了灯盏花查尔酮异构酶(CHI)的编码cDNA序列,序列在GenBank上的注册号为GU208824.1。该基因通过中间载体pCAMBIA1300,以LB4404介导导入灯盏花。对所获8株转基因植株的测定结果表明8株转基因植株的黄酮及灯盏乙素含量均有不同程度的提高,黄酮含量提高幅度为2-7.6倍,灯盏乙素含量提高幅度为0.9-2.4倍。表明通过CHI基因的导入可有效提高灯盏花转基因植株的黄酮及灯盏乙素含量。为利用CHI导入构建高黄酮含量工程株奠定了基础。同时应用相关软件对灯盏花CHI编码序列的蛋白质的基本理化性质、跨膜结构域、疏水性、蛋白质二级结构和三级结构、分子系统进化等参数进行了预测和推理。为下一步定性改变灯盏花中黄酮的组分及其含量奠定了基础。

评估说明

    国家自然科学基金项目“灯盏花CHI基因的克隆、转化及其对灯盏花药用成分的影响”发布于爱科学iikx,并永久归类于相关科学基金导航中,仅供广大科研工作者查询、学习、选题参考。国科金是根据国家发展科学技术的方针、政策和规划,以及科学技术发展方向,面向全国资助基础研究和应用研究,发挥着促进我国基础研究源头创新的作用。国科金的真正价值在于它能否为科学进步和社会发展带来积极的影响。

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