中文摘要
利用分子生物学技术,构建并表达了靶向P选择素(P-selectin)的单链抗体ScFv Crry和ScFv CD59靶向补体抑制物,通过体外实验(补体裂解抑制、流式细胞分析、生物传感器亲和力分析等)和体内实验(生物学分布和免疫组化)鉴定其生物学活性,同时建立了类风湿关节炎小鼠模型,在小鼠发展为类风湿关节炎前后尾静脉分别注射ScFv Crry和ScFv CD59靶向补体抑制物蛋白,通过临床评分、免疫学、分子生物学和病理学检测,观察其对类风湿关节炎的治疗作用。最终获得具有抑制类风湿关节炎的P-selectin靶向补体抑制物蛋白,为研究新的炎症靶向治疗药物奠定基础。
结题摘要
类风湿性关节炎(RA)在全世界被视为影响人类健康的五大疾病之一,它是一种以关节病变为主,能引起肢体严重畸形的慢性、全身性、免疫性疾病。研究表明类风湿性关节炎是免疫系统调节功能紊乱所致的炎症反应性疾病。现已有很多证据证明类风湿性关节炎的发生与补体的激活和P选择素的高表达密切相关。通过以P-选择素(P-selectin)作为"靶标",抗P-selectin的单链抗体(ScFv)为载体,Crry和CD59等补体抑制物作为"弹头",将两者基因融合表达,利用胶原诱导的类风湿性关节炎小鼠模型,最终获得CHO细胞表达的ScFv Crry和ScFv CD59靶向补体抑制物融合蛋白,体内体外证实ScFv Crry靶向补体抑制物治疗和预防炎症的效果,为研究新的炎症靶向治疗药物奠定基础。这种融合蛋白的优点是:不仅对炎症部位有靶向作用,还对于炎症有关的两条激活途径进行抑制,这将极大提高抗炎作用,同时降低用药剂量,降低副作用。
