血红密孔菌Pycnoporus sanguineus MK528 是我们自行分离的漆酶产量特别高的白腐真菌菌株，它还可以产生显著量的香料和色素，具有诱人的工业应用开发前景。本研究首先研究建立P.sanguineus 的DNA转化方法；分离P.sanguineus漆酶基因及其启动子，进而以漆酶基因为报告基因，构建表达载体，研究建立和改进P.sanguineus蛋白表达系统，为探讨P.sanguineus漆酶形成的调控、漆酶异常高产的分子机制和漆酶基因的结构功能关系等基础理论研究提供必须的分子生物学基础。本申请不仅提供可实用化的P.sanguineus漆酶基因工程菌，还将为白腐真菌中有重要应用价值的其它酶类的生产提供一个具有自主知识产权的高效表达平台。

丝状真菌同源表达系统可使丝状真菌来源的蛋白产量获得明显的提高，Pycnoporus sanguineus MK528是我们自行分离的漆酶产量特别高的白腐菌真菌菌株，具有诱人的工业应用前景。本基金项目利用原生质体-PEG转化法建立了P. sanguineus 的DNA转化方法；克隆到P . s a n g u i n e u s 漆酶包括启动子和终止子的全基因序列以及不同来源的丝状真菌启动子。以潮霉素抗性基因为筛选标记，构建了P. sanguineus 漆酶分泌表达载体，初步获得同源转化的P. sanguineus 漆酶基因工程菌。研究结果表明：经过密码子优化的潮霉素抗性基因利于其在P. sanguineus 中的表达， Lentinus edodes来源的GPD启动子比Trametes versicolor来源的GPD启动子引导潮霉素抗性基因表达的效果要好。本研究不仅为白腐真菌中有重要应用价值的蛋白提供了一个高效表达平台，同时也为探讨P. sanguineus 漆酶形成的调控、漆酶异常高产的分子机制等基础理论研究提供了必需的分子生物学基础。