中文摘要
在前期工作中通过蛋白芯片飞行时间质谱先后发现了20余个对卵巢癌具有潜在诊断意义(均为p<0.01)的蛋白峰,但由于目前方法鉴定蛋白成功率低,仅成功鉴定了少数几个蛋白,因此,拟在此基础上,以卵巢癌中占50%的浆液性上皮癌的血浆为研究对象,以卵巢交界性、良性浆液性瘤和非卵巢肿瘤病人血浆为对照,利用自由流等电聚焦(FFE-IFE)技术对蛋白组分按等电点加以分离,通过SDS-PAGE电泳和凝胶染色图谱分析,确认卵巢癌特异性蛋白条带,对含量低的特异蛋白可通过多次FFE或加大上样量以及冻干浓缩到达富集的效果,经统计学方法建立诊断模型,对确认的差异蛋白(含量变化超过2倍)进行二级质谱鉴定,明确为何种蛋白,为通过免疫检测验证所获蛋白的诊断价值,用于卵巢癌早期诊断/筛查、手术及化疗效果评价及预测复发奠定基础,也为从蛋白质到基因的逆行途径研究卵巢癌发生机制提供新的线索。
结题摘要
目前提高卵巢癌病人生存率的关键在于早期诊断,卵巢癌的发生有可能带来血浆蛋白质组学上的变化。血浆蛋白成分复杂,自由流电泳采用液相介质,通过等电聚焦能简化蛋白成分。我们研究卵巢癌蛋白质组学,希望能发现卵巢癌早期诊断的血浆标志物。方法:收集32例浆液性卵巢癌病人血浆,其中早期组包括I,II期7例,晚期组包括III,IV期25例,收集10例卵巢囊肿病人血浆作为对照组,将对照组,早期组,晚期组血浆分别等体积混合后,使用自由流电泳分离,iTRAQ定量蛋白质组学方法分析。结果:鉴定出蛋白为载脂蛋白A-II前原蛋白,白蛋白前原蛋白,载脂蛋白F前原蛋白,血管紧张肽原,载脂蛋白A-I前原蛋白,血清淀粉状蛋白前原蛋白,alpha-2-HS糖蛋白,丝氨酸蛋白酶抑制物,血清类粘蛋白1前原蛋白,运甲状腺素蛋白,补体4A前原蛋白, 其中肿瘤组载脂蛋白A-II前原蛋白含量显著增高,白蛋白前原蛋白显著降低。结论:我们筛选出载脂蛋白A-II前原蛋白为卵巢癌可能的标志物,但其意义还需进一步探讨。
