中文摘要
SREBP-1是脂肪细胞分化过程中重要的转录因子,具有调控脂肪细胞分化、脂肪酸和甘油三酯合成的功能,但SREBP-1对脂肪细胞分化影响的结果存在分歧,其生物学功能是否存在种属及组织特异性仍不确定。本项目拟应用鱼脂肪细胞离体培养技术,将构建的pSREBP-1-Luc,pHA-cDNA SREBP-1, pFlag-PPARγ及pHis-RXR表达载体分别及同时转染鱼前体脂肪细胞、成熟脂肪细胞,通过检测细胞周期、形态学参数、转录调控因子、分化标志基因及关键生脂酶表达差异,研究SREBP-1单独作用及SREBP-1-PPARγ共同作用下,SREBP-1对脂肪细胞增殖分化及关键生脂基因表达的影响,分析SREBP-1与PPARγ在鱼脂肪细胞生脂过程中的关系。本研究的意义在于阐明SREBP-1调控鱼脂肪细胞生脂的作用通路,完善对鱼脂肪沉积分子机理的认识,为控制鱼体脂沉积和研究人类肥胖提供参考。
结题摘要
SREBP-1是脂肪细胞分化过程中重要的转录因子,但SREBP-1对脂肪细胞分化影响的结果存在分歧。本项目应用草鱼脂肪细胞离体培养技术,将构建的pSREBP1-Luc,pHA-cDNA SREBP1, p Flag-PPARγ表达载体分别及同时转染各阶段细胞,通过检测细胞周期、形态学参数、转录调控因子、分化标志基因表达,研究SREBP-1单独及SREBP-1-PPARγ共同作用下,SREBP-1对脂肪细胞增殖分化及关键生脂基因表达的影响。结果表明:pHA-cDNA SPREBP-1转染的鱼脂肪细胞与未转染细胞比较,其前体脂肪细胞、脂肪细胞的增殖和分化能力显著增强(P<0.05),SREBP-1-PPARγ共同作用下,SREBP-1促分化能力达到最强(P<0.05);在胆固醇存在条件下,与未转染细胞比较,SREBP-1对鱼脂肪细胞促分化能力明显减弱;在胰岛素存在条件下,与未转染细胞比较,SREBP-1对鱼脂肪细胞促分化能力明显增强。提示SREBP-1可促鱼脂肪细胞增殖分化,并增强生脂通路中下游靶基因的表达。本项目的完成对完善鱼脂肪沉积分子机理具有重要的理论意义。
