RNA 沉默介导抗性是植物抗病毒基因工程领域中新的抗病毒策略。本项目拟在已分离克隆PStV-CP基因和建立的高效农杆菌介导的花生遗传转化系统工作的基础上，分别构建不同长度PStV-CP基因片段的非翻译反向重复序列植物表达载体并转化至花生受体中，获得抗病转基因花生；利用DAS-ELISA和分子杂交等技术手段，分析比较不同长度CP基因所诱导转基因花生产生RNA沉默介导的抗性水平差异和病毒特异性siRNA 在转基因花生中的分布和积累情况；研究转基因拷贝数、插入位点和插入方式与转基因花生及其后代抗病性的相关性。揭示非翻译PStV-CP 基因片段在转基因花生后代中的遗传规律及RNA沉默介导抗性的遗传稳定性， 探讨RNA沉默介导抗性转基因花生的抗病机理，为RNA沉默介导抗性转基因花生的应用提供理论依据。

RNA介导抗性是植物抗病毒基因工程领域中新的抗病毒策略。反向非翻译重复序列转基因通过转录产生dsRNA，有效引发转基因植物RNA沉默，赋予转基因植物RNA介导抗性。本课题利用PStV-CP基因构建了三个含有不同长度CP基因的非翻译反向重复的植物表达载体pPSCP2、pPSCP4和pPSCP6；经农杆菌介导转化获得了49 株T0代转基因花生，其中pPSCP2幼苗17株、pPSCP4幼苗19株、pPSCP6幼苗13株。病毒接种试验表明，23株为抗病或者免疫；15株为延迟发病；12株为感病。其中转pPSCP2的免疫或抗病株数共11株，占总免疫株数的45%。表现高抗或者免疫的T0代转基因植株通过2次自交获得T2代，在44株T2代株系中有37株为抗病或者免疫；5株为延迟发病；2株为感病，其中3个转pPSCP2的T1代株系和1个转pPSCP4的T1代株系的自交后的T2代没有出现感病或者表现延迟发病，其高抗或免疫能力在后代中可以稳定遗传。本研究成功地利用双链dsRNA策 略获得对PStV 具有高抗或者免疫的转基因花生株系，为以后的花生抗病毒性研究奠定了技术和理论基础。