中文摘要
本项目首先用微流控芯片技术,构建微通道和细胞培养小室,模拟肝小叶的结构和营养供给,使肝细胞能长期存活于芯片上;并通过检测白蛋白合成分泌等鉴定肝细胞功能;然后利用CCL4攻击肝细胞,模拟肝细胞损伤并鉴定;最后通过进样通道移入荧光标记的骨髓间充质干细胞和血管内皮干祖细胞,连续观察这些成体干细胞在肝小叶环境下的植入和分化,并在芯片上进行免疫组化和原位PCR并杂交检测干细胞的基因表达。本项目旨在于芯片上建立直观的肝小叶组织单元,并使其能模拟体内组织单元的全部或部分功能,用以直观的研究干细胞在受损组织微环境下的细胞分化和基因表达。
结题摘要
本项目首先分离培养并鉴定了骨髓间充质干细胞,其次检测了其在微流控芯片上向肝细胞的分化能力。然后用微流控芯片技术,模拟肝小叶的结构和营养供给,使肝细胞能长期存活于芯片上;并通过检测丙氨酸氨基转移酶和天门冬氨酸氨基转移酶活性鉴定肝细胞功能;然后利用CCL4攻击肝细胞,模拟肝细胞损伤;最后通过进样通道移入荧光标记的骨髓间充质干细胞,连续观察骨髓间充质干细胞在肝小叶环境下的植入情况,并评价植入骨髓间充质干细胞对损伤肝细胞功能的修复以及抗凋亡能力。结果证明CCL4可有效地造成肝功能损伤,植入骨髓间充质干细胞共培养后,可有效地恢复肝细胞功能,降低AST、ALT酶活,并减少细胞质损伤和细胞凋亡。损伤的肝细胞能增加骨髓间充质干细胞的植入。本项目还通过微流控芯片技术。进一步证明了骨髓间充质干细胞可减少炎性因子引起的胰岛β细胞损害。
