免疫编辑影响肿瘤生物治疗的结局，本研究前期结果显示NK编辑后的乳腺癌细胞株出现3种miRs家族分子表达降低，与杀伤时间和效靶比呈反比，经多次杀伤诱导的耐NK杀伤乳腺癌细胞miRs减低显著，生物信息学显示miRs均负调控参与NCR通路的HSP和BAG家族分子。因此提出"调节肿瘤细胞miRs表达可逆转瘤细胞在免疫编辑后耐受NK细胞杀伤"的假说，本研究：1)探询NK编辑后瘤细胞miRs持续低表达的机制；2) 下调亲本乳腺癌细胞miRs表达，上调耐NK杀伤瘤细胞的miRs表达，观察干预miRs后NK对瘤细胞杀伤的变化,Hsps和BAGs基因表达量及形式的变化。3)观察调节miRs对NK编辑后瘤细胞成瘤性、分化、转移、耐药等特性的影响。4）以免疫抵抗的乳腺癌干细胞为模型，进一步验证miRs可调控免疫耐受。本研究为阐明NK杀伤效应诱导瘤细胞免疫耐受的机制提供理论基础，为基因治疗与生物治疗提供契合点。

本课题已构建多次NK杀伤诱导的乳腺癌细胞MDA-MB-231免疫耐受亚株，芯片分析亲本细胞与之区别，miR320和miR29表达显著下调，HSP20、70分子明显上调，并与BAT3结合由胞质转位于胞膜并释放入培养基。可溶性BAT3作为配体，可封闭Nkp30，抑制NK细胞对肿瘤细胞的杀伤。课题进一步引入CTC 细胞，应用HTA芯片检测CTC与手术标本长非编码RNA（lcnRNA）,ECT, SNP,mRNA和miR差异，发现12个lcnRNA和转录因子CREB、STAT1 及c-jun等 8 个转录因子的 mRNA 均高于手术原发灶标本，与 CREB 共 Hostgene 的 miR-372（与miR302同一Cluster）呈同向高表达。生物信息预测提示，CREB调控MHCI 类分子(HLA-Bw 和 C1/2)及 HSP70 的表达，及 NK 细胞抑制性细胞因子TGFβ的分泌调节。课题还应用VitD处理MDA-MB-231细胞，发现miR-302c和miR-520c 表达下调，而NK细胞活化受体NKG2D配体MICA/B及ULBP2上调，对NK细胞杀伤敏感性相应上调。课题发现通过ADM渐次提高浓度诱导耐药亚株的MDA-MB-231/ADM的miR-663启动子去甲基化高表达，靶向调控HSPG2和CCBP2在调节耐药的同时可能参与其免疫调节。