红色毛癣菌是浅部真菌感染的最常见致病菌，外分泌蛋白酶被认为是红色毛癣菌最为重要的毒力因子。但是目前针对红色毛癣菌毒力因子的研究仍局限于体外研究阶段，各种蛋白酶在组织入侵及抵制宿主防御上的作用并未在体内试验中得到验证。我们在申请者以及国内外最新研究成果的基础上开展红色毛癣菌毒力因子的体内以及半离体研究。以红色毛癣菌感染患者、动物模型为研究对象,采用双向电泳、明胶酶谱等方法分离鉴定各种蛋白水解酶;采用Real Time RT-PCR等方法检测相关基因的在体表达水平并与体外培养的菌株相比较；并在国际上首次采用RNA干扰技术将感染宿主时表达明显上调的蛋白酶基因进行逆转，通过半离体感染模型以及动物感染模型比较逆转前后菌株毒力的变化；从而明确外分泌蛋白酶的致病性，发现并确定新的毒力因子。此项研究工作的开展对于填补皮肤癣菌毒力因子体内研究的空白、针对毒力因子开发新型的抗真菌药物和治疗方法都具有重要意义。

红色毛癣菌可以感染人体皮肤、指（趾）甲导致不同部位的皮肤癣菌病。外分泌蛋白酶被认为是红色毛癣菌最为重要的毒力因子。通过本课题的研究，我们发现SUB7 和MEP2可能分别是目前已知的枯草杆菌蛋白酶样蛋白酶和金属蛋白酶家族中最为重要的毒力因子，在降解人体角蛋白和侵袭感染中起主要的作用，其他蛋白酶可能其辅助作用。同时还明确了各种蛋白酶的底物选择性，从而从分子水平阐明了红色毛癣菌的广泛适应性。由于皮肤的炎症和免疫反应是皮肤癣菌病发病机制的重要环节，我们进一步研究皮肤角质形成细胞表面的模式识别受体（PRR）对红色毛癣菌的识别，研究发现受体PTX3以及TLR1、2、4、6在角质形成细胞对红色毛癣菌的识别上发挥主要作用。最后我们采用（2D-LC/MS/MS）质谱方法对不同培养条件下红色毛癣菌培养上清液进行蛋白质分析、鉴定和比较，获得多种功能尚未明确的分泌性蛋白质，克服了以往研究仅能分离鉴定几种新的蛋白质的缺陷。并为今后进一步研究红色毛癣菌致病性，针对毒力因子开发新型的抗真菌药物和治疗方法奠定理论基础。