籽粒硬度是小麦的重要性状之一，是决定小麦品质、最终用途和国际贸易的重要指标之一，Puroindoline是控制小麦籽粒硬度的主效蛋白。申请者从粘果山羊草和粗山羊草中获得了两个新型籽粒硬度主效基因Pin a-allele-7和Pin b-allele-2，它们在色氨酸功能结构域均有变异位点，且对应于软质表型。该功能结构域是Puroindoline蛋白的类脂结合区域，该区域的变异导致小麦籽粒硬质表型，

籽粒硬度是小麦的重要性状之一，是决定小麦品质、最终用途和国际贸易的重要指标之一，Puroindoline是控制小麦籽粒硬度的主效蛋白。本研究将在色氨酸功能结构域存在变异位点的两个新型籽粒硬度主效基因Pina-allele-7和Pinb-allele-2，与绿色荧光蛋白基因连接，将融合基因插入到真核表达载体pcDNA3.1(+)，通过脂质体转入CHO细胞，经荧光观察和RT-PCR检测，证明了pin基因在真核细胞中的成功表达；对小麦近缘野生物种三芒山羊草Ae. triaristata、叙利亚山羊草Ae.vavilovii、偏凸山羊草Ae. ventricosa、欧山羊草Ae. biuncialis和柱穗山羊草Ae. cylindrica等5种材料中进行了籽粒硬度基因序列分析，获得了5个新型籽粒硬度主效基因，其中包括色氨酸功能结构域的变异。本课题的实施为通过pin基因的真核表达研究pin基因的结构与功能，以及通过pin基因DNA免疫方法制备PINA蛋白抗体提供了可能，为阐明Pin基因结构与籽粒硬度关系、完善小麦籽粒硬度控制理论和丰富麦属植物遗传资源库奠定基础。