愈来愈多的实验表明天冬氨酸组织蛋白酶D可能参与了多种肿瘤的形成，然而其在肿瘤形成过程中的分子机制尚不得而知。我们的前期研究表明，通过构建knockdown和高表达的稳定细胞株，天冬氨酸组织蛋白酶D基因表达水平与细胞增殖成正相关，即它的表达水平降低可导致细胞增殖速度减慢。我们还进一步发现降低天冬氨酸组织蛋白酶D的丰度显著地诱发了细胞老化现象。因此，在本研究计划中我们将深入探索天冬氨酸组织蛋白酶D影响细胞老化的分子机制，特别是该酶与p53和pRb信号通路之间的关系。

Cathepsin D（CTSD）是一种分泌蛋白质，广泛地被报道与肿瘤相关，但是其参与肿瘤形成的机制仍然未见报道。我们通过构建了CTSD低表达和高表达的两种细胞模型，发现CTSD的低表达能够显著地诱导细胞衰老，进而减慢细胞生长，并诱发肿瘤生长；反之亦然。通过对经典细胞衰老信号通路p53和pRb的检测，我们发现CTSD的低表达所引发的细胞衰老并不经过p53和pRb信号通路，提示在Hela细胞中CTSD低表达引发的细胞衰老可能是经由不依赖于p53和pRb信号通路的新信号通路所介导。我们利用免疫沉淀结合蛋白质组学的方法鉴定了一种与CTSD相互作用的蛋白质GRP78。GRP78的低表达同样可以引发细胞的衰老，且随Cath D/GRP78复合体的减少，细胞衰老显著减少，提示CTSD可能通过与GRP78形成复合体来参与细胞衰老。我们分析了CTSD低表达对细胞周期的影响，发现CTSD低表达诱发85%的细胞进入G2/M阻滞；分析了CTSD低表达细胞和对照细胞的转录因子活性，发现CTSD低表达引起细胞核内转录因子活性的显著改变。本研究首次发现CTSD与细胞衰老的关系，并对其参与细胞衰老的机制进行了探讨。