中文摘要
SBgLR基因是从马铃薯中分离的一个花粉发育晚期特异表达的基因,可能作为微管结合蛋白参与花粉的成熟过程和花粉粒的萌发。我们研究发现其表达调控方式精细而复杂,启动子中有多个顺式作用元件促进或阻遏基因的表达。其中在启动子-227至-209的特殊的回文序列具有抑制基因在花粉中表达的作用。本项申请利用酵母单杂交系统获得调控SBgLR基因在花粉中表达的特异转录因子及可能存在的负调控因子,通过研究转录因子作用的靶序列及调控方式,证明SBgLR基因启动子是通过多个顺式作用元件(特别是回文序列)与转录因子相互协同作用,共同完成精确引导下游基因在花粉中特异表达的调控过程,建立SBgLR基因的转录调控模型,为最终揭示花粉发育调控的分子机理提供理论依据。
结题摘要
SBgLR 基因是从马铃薯中分离的一个花粉发育晚期特异表达基因,可能作为微管结合蛋白参与花粉的成熟过程和花粉粒的萌发。我们研究发现其表达调控方式精细而复杂,启动子中有多个顺式作用元件促进或阻遏基因的表达。驱动基因在花粉中表达的关键元件位于-269~-9区段,序列分析发现在-269~-9区段上,分布着包括AGAAA、TTTCT和TCAC的十个拷贝的花粉调控元件,其中在启动子-227 至-209 的特殊的回文序列具有抑制基因在花粉中表达的作用。利用酵母单杂交系统,构建了包含SBgLR启动子-269~-9不同区段的6个酵母单杂交诱饵载体,从马铃薯花粉中筛选到一个与启动子-180~-168区结合的蛋白StTrih,该蛋白具有转录因子Trihelix的结构特性,与烟草转录因子NtBoxII (AAB23811.1)和拟南芥GT1a (2103313A)的相似性为79%,与大豆转录因子GT-1(ABX79677.1)的相似性为77% 。推测其可能通过与SBgLR启动子-180~-168区段结合参与调控SBgLR 基因在花粉中的特异表达。
