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RCA与Rubisco互作及其与水稻抗逆性的关系

RCA与Rubisco互作及其与水稻抗逆性的关系
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  • 批准号:30471051
  • 批准年度: 2004年
  • 学科分类:作物生长发育生理(C130201) |
  • 项目负责人:蒋德安
  • 负责人职称:教授
  • 依托单位:浙江大学
  • 资助金额:22万元
  • 项目类别:面上项目
  • 研究期限:2005年01月01日 至 2007年12月31日
  • 中文关键词: RCA;Rubisco;互作;水稻;抗逆性
  • 英文关键词:;mutant;;photosynthetic characteristics;stress resistance

项目摘要

中文摘要

从水稻叶片中分别提取、纯化Rubisco大小亚基,用体外表达法获得RCA大小同工型,制成单克隆抗体,建立快速准确的Rubisco大小亚基和RCA同工型蛋白的ELISA技术体系。用该技术平台,结合免疫电镜定位技术、免疫沉淀技术,研究两酶各亚基和同工型的互作关系,不同RCA水平的突变体与Rubisco蛋白和mRNA的表达的互作关系,探索低RCA导致Rubisco全酶蛋白增加的可能机理。研究不同RCA水平的突变体的CO2同化能力和活体叶绿素荧光特性,明确多大程度的RCA突变可以对光合能力导致显著影响,在能量转换和碳同化水平阐明RCA突变影响光合作用的关键部位。通过对不同RCA水平的突变体后代在温度和水分逆境下亚基基因表达、酶活性、酶蛋白细胞定位等研究。探索在逆境对不同亚基和同工型表达及细胞定位的影响,明确RCA在抗逆境中的可能作用和转基因利用价值。

结题摘要

制备了Rubisco(核酮糖1,5,二磷酸羧化酶/加氧酶)大小亚基和RCA(核酮糖1,5,二磷酸羧化酶/加氧酶活化酶)大小亚基单克隆抗体,建立了不同亚基的ELISA测定方法,获得了RCA正义转基因水稻T1代。RCA含量与气体交换和叶绿素荧光的关系表明,RCA在稳态光合下有冗余,其反义突变可显著增加Rubisco含量。用免疫金标记,首次报告RCA分布在叶绿体基质和类囊体膜上,在RCA含量降低突变体中,其在叶绿体基质中的分布比例提高。40℃高温处理一周内,光合先下降后回升。这种下降和回升与Rubisco羧化活力的回升及Rubisco和RCA含量的动态变化相符合,但高温导致PSII最大荧光下降要迟于光合的降低。RCA反义突变体中Rubisco大亚基的增加比小亚基明显。40℃高温处理对反义RCA突变体和野生型在光合碳同化及活体叶绿素荧光等参数的影响相似,但突变体表现得较迟钝。高温处理使Rubisco总量及大亚基含量下降,但小亚基含量提高,RCA突变体表现尤为明显;高温处理水稻后,短时内RCA总量增加,无论RCAI或RCAII,野生型反应比突变体快。RCA反义突变明显降低水稻对干旱胁迫的耐性。

评估说明

    国家自然科学基金项目“RCA与Rubisco互作及其与水稻抗逆性的关系”发布于爱科学iikx,并永久归类于相关科学基金导航中,仅供广大科研工作者查询、学习、选题参考。国科金是根据国家发展科学技术的方针、政策和规划,以及科学技术发展方向,面向全国资助基础研究和应用研究,发挥着促进我国基础研究源头创新的作用。国科金的真正价值在于它能否为科学进步和社会发展带来积极的影响。

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