心肌肥厚已成为心血管意外事件发生的独立危险因素，导致室性心律失常、心肌缺血、心力衰竭、猝死等，其确切机制尚不明了。近年研究发现miRNAs在心肌肥厚进程中起着重要的调控作用。本项目是上一国家自然基金的延续，前期研究发现心脏M3受体能够调节参与心肌肥厚进程的miRNAs的表达，并调节一些被证实为参与心肌肥厚的蛋白以及激酶。因此，本项目首次提出心脏M3受体参与心肌肥厚进程，通过调控miRNAs调节心肌肥厚；首次应用心脏特异性过表达M3的转基因小鼠建立心肌肥厚模型，采用在体、离体方法研究M3受体的抗心肌肥厚作用；用基因芯片、分子生物学技术以及电生理方法，从转录后水平研究心肌肥厚过程中miRNAs、心肌肥厚基因和蛋白的表达变化，检测心肌肥厚时电流变化及M3受体对此的影响，揭示心脏M3受体抗心肌肥厚的新机制，为心肌肥厚的预防和治疗提供理论依据。

本项目通过体内外实验，采用形态学、分子生物学及电生理等技术研究心脏M3受体抗心肌肥厚的作用及分子机制。本项目主要完成内容：1）成功建立昆明小鼠、BABL/C小鼠以及过表达M3受体转基因小鼠的心肌肥厚模型，完成心脏功能的测定。2）完成心肌肥厚形态学检测以及心脏体重比测量，验证心肌肥厚模型，揭示M3受体抗心肌肥厚的重要作用。3）筛选并确定相关的候选miRNA，采用real-time PCR技术并建立Luciferase系统进行验证，阐明M3受体通过调控miR-133发挥抗心肌肥厚的重要分子机制。4）明确M3受体通过调节calcineurin及p38 MAPK信号通路进而抑制肥厚情况下心肌细胞钙超载，发挥心肌保护作用。5）建立M3受体转基因动物模型，验证M3受体抗心肌肥厚的保护作用及机制。6）观察M3受体对肥厚心肌细胞K+、Ca2+通道电流以及动作电位时程的变化。综上，本项目应用多种心肌肥厚动物、细胞模型，并应用转基因模式动物，阐明M3受体抗心肌肥厚作用，并首次揭示M3受体通过调控miR-133及下游钙信号转导通路抗心肌肥厚的新机制。综上，本项目可为心肌肥厚的防治提供新靶点及新思路。