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枸杞糖链LbGp4-OL化学结构中免疫活性决定簇及在B细胞膜上结合蛋白的研究

枸杞糖链LbGp4-OL化学结构中免疫活性决定簇及在B细胞膜上结合蛋白的研究
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  • 批准号:30672629
  • 批准年度: 2006年
  • 学科分类:中药内分泌及代谢药理(H2811) |
  • 项目负责人:齐春会
  • 负责人职称:副研究员
  • 依托单位:中国人民解放军军事医学科学院
  • 资助金额:28万元
  • 项目类别:面上项目
  • 研究期限:2007年01月01日 至 2009年12月31日
  • 中文关键词: LbGp4-OL;决定;细胞膜;结合;蛋白
  • 英文关键词:;chemical structure;immunoreactive;;binding protein

项目摘要

中文摘要

免疫调节作用是中药多糖的共性,但因多糖分离纯化和结构分析困难,使其构效关系及分子机理特别是作用受体研究受到限制。本研究集体在两个国家自然科学基金面上项目的资助下,成功分离得到组分均一、结构明确的枸杞糖链LbGp4-OL并确证B淋巴细胞是其免疫作用的靶细胞,在B细胞膜上存在它的结合位点。本项目拟在此基础上,运用化学和酶学方法将LbGp4-OL及其主链降解为不同分子量和不同结构的片段,经免疫活性评价确定其中主要活性片段,分析其结构,阐释LbGp4-OL化学结构中的"活性中心"即免疫活性决定簇;同时制备小鼠B细胞膜蛋白和3H标记的LbGp4-OL,运用双向凝胶电泳和放射自显影寻找LbGp4-OL在B细胞膜上的特异结合蛋白,通过质谱分析确定该蛋白的种类和性质,为下一步研究LbGp4-OL在B细胞膜上的受体蛋白奠定基础。本项目对阐明枸杞多糖构效关系、免疫作用分子机理及糖类药物研究与开发具有重要意义。

结题摘要

免疫调节作用是中药多糖的共性,但因多糖分离纯化和结构分析困难,使其构效关系及作用受体研究受到极大的限制。本项目在化学研究方面,成功分离得到组份均一、结构明确的枸杞糖链LbGp4-OL,累积了足量的糖链LbGp4-OL样品;经过大量的文献调研和标记方法的比较,建立了对LbGP4-OL进行位点选择性FITC荧光标记的方法,并获得了与未标记的LbGp4-OL活性一致的FITC-LbGp4-OL。药理学研究方面,我们确证了B淋巴细胞是其免疫作用的靶细胞,在B细胞膜上存在其结合位点,并进一步发现LbGP4-OL作用的B淋巴细胞主要为活化的B淋巴细胞,对静息的B淋巴细胞无明显影响。同时,用CD19等抗体封闭FITC-LbGp4-OL与B细胞的结合,初步确定CD19分子可能是LbGp4-OL作用的靶分子之一。后续的工作中,将裂解糖链LbGp4-OL,获得不同长度的多糖片段,探讨该多糖是否存在"活性中心",并采用CD19Cre突变小鼠B淋巴细胞进一步确定CD19分子是否为其作用的靶分子。本研究表明,多糖作用的靶分子并不局限于Tool样受体一类的模式识别受体,这将为多糖作用靶分子的研究提供一条新思路。

评估说明

    国家自然科学基金项目“枸杞糖链LbGp4-OL化学结构中免疫活性决定簇及在B细胞膜上结合蛋白的研究”发布于爱科学iikx,并永久归类于相关科学基金导航中,仅供广大科研工作者查询、学习、选题参考。国科金是根据国家发展科学技术的方针、政策和规划,以及科学技术发展方向,面向全国资助基础研究和应用研究,发挥着促进我国基础研究源头创新的作用。国科金的真正价值在于它能否为科学进步和社会发展带来积极的影响。

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