中文摘要
放、化复合损伤后的机体状况符合"元气耗损、身体虚弱"的传统藏医"滋补"适用范围;我们的前期工作显示:被《四部医典》誉为"全身上下皆宜"且已有部颁标准的传统藏医经典滋补方"巴桑母酥油丸",可以剂量依赖性地提高放、化复合损伤小鼠外周血白细胞、红细胞、血红蛋白和网织红细胞数量。本课题拟采用较长时间体内用药、不同时间取材的方式,通过细胞培养、组织切片、骨髓移植、适时荧光定量PCR、流式细胞术、血清化学等技术,从造血器官、造血组织、基质细胞、造血干细胞、祖细胞、骨髓细胞、造血调节因子及受体、药物入血等角度,系统研究"巴桑母酥油丸"对放、化复合损伤小鼠造血功能的干预作用和机理,阐明传统藏医对放、化复合损伤机体的"滋补"功效和生物学实质。本研究是在藏医"滋补"适用对象和功效理论指导下,首次对其干预放、化疗后造血功能进行研究,对缓解肿瘤放、化疗后毒副作用及佐证和诠释传统藏医"滋补"理论意义重大。
结题摘要
本项目以放-化疗后机体状况符合“七精耗损”藏医“补益”法适用范围为指导,以放射线-化学复合损伤小鼠模拟放-化疗后机体状况,以藏医经典滋补方巴桑母酥油丸进行干预,采用细胞培养、组织切片、同种异体骨髓移植、适时荧光定量PCR、流式细胞术、HPLC等技术,从造血器官、造血组织、基质细胞、造血干细胞、祖细胞、骨髓细胞、造血调节因子及受体、药物入血等角度系统研究了巴桑母酥油丸对放-化复合损伤机体造血功能的干预及其机理。本研究完成了任务书中全部10个内容的研究,并根据研究需要和实验进展调整观测指标二个(基质细胞增殖能力?粘附能力;IL-3基因表达? SCF-1基因表达);发表论文12篇,其中期刊论文10篇,核心5篇,完成本科生毕业专题实习2名。研究结果显示:巴桑母酥油丸灌胃后60min左右开始明显吸收,并可能产生了不同于体外成分的新成分;巴桑母酥油丸可促进放-化疗复合损伤小鼠外周血相恢复,疗效随着用药时间延长而提高,中、高剂量组间没有明显差异。对其促进血相恢复的机制研究显示:巴桑母酥油丸可能通过:促进放、化复合损伤小鼠骨髓细胞晚期红系祖细胞(CFU-E)、早期红系祖细胞(BFU-E)、粒-巨噬系祖细胞(CFU-GM)集落的形成;促进骨髓细胞进入增殖活跃的S+G2/M期;提高骨髓造血组织面积百分比,促进造血组织恢复;提高骨髓基质细胞对造血细胞的粘附能力;提高骨髓GM-CSF、GM-CSFR和肾脏EPO的基因表达;促进作为供体进行移植后的造血干细胞在受体体内重建造血的能力等方式促进放-化复合损伤机体造血功能的恢复。但:无论移植前后,巴桑母酥油丸对模型小鼠骨髓细胞的Sca-1+细胞率、巨核系祖细胞集落(CFU-Meg)产率均无明显影响,提示其对造血细胞的作用可能具有阶段和系别差异;小鼠脾脏指数、脾脏细胞EPO受体表达也无显著变化,提示巴桑母酥油丸促进模型小鼠造血功能恢复的靶器官可能以骨髓为主。本研究证实了藏医滋补方可用于肿瘤放-化疗后机体滋补的假设,为藏医滋补疗法的疗效提供了生物学基础和依据,为缓解肿瘤放化-疗后毒副作用提供了新的研究思路。本研究还就中医滋补方剂左、右归丸对先天不足小鼠造血系统的干预作用进行了探索,结果显示左归丸可提高骨髓细胞Sca-1+细胞率,右归丸可提高骨髓细胞SCFmRNA 相对表达量,提示以“补”为主导,可能成为祖国各民族传统医药改善造血干细胞质、量的突破口。
