G蛋白偶联雌激素受体（GPER），是一种膜相关雌激素结合蛋白，具备与雌激素结合的相关结构和所有特征，申请者既往研究发现，子宫内膜癌的发生与雌激素激活PI3K/AKT信号通路等非转录效应有关，而且，雌激素受体（ER）低表达细胞中，该效应与ER无关，是否GPER介导了雌激素的非转录效应？尚不清楚。本项目在前期研究基础上，应用免疫杂交、免疫沉淀和shRNA技术等手段，通过体内体外实验，观察子宫内膜癌细胞雌激素活化PI3K/AKT通路过程中GPER的变化规律，ER有无表达及变化，GPER与PI3K能否免疫共沉淀，高表达GPER的内膜癌细胞阻断GPER作用后对雌激素活化PI3K/AKT通路影响以及阻断GPER-PI3K/AKT通路对内膜癌细胞增殖凋亡和裸鼠成瘤的影响，研究雌激素激活PI3K/AKT信号通路等非转录效应机制，对揭示子宫内膜癌的发病规律有重要意义，为子宫内膜癌的有效防治提供新思路。

？G蛋白偶联雌激素受体（GPER），是一种膜相关雌激素结合蛋白，具备与雌激素结合的相关结构和所有特征，既往研究发现，子宫内膜癌的发生与雌激素激活PI3K/AKT信号通路等非转录效应有关，而且，雌激素受体（ER）低表达细胞中，该效应与ER无关，是否GPER介导了雌激素的非转录效应？尚不清楚。本项目在前期研究基础上，应用免疫杂交、免疫沉淀和shRNA技术等手段，通过体内体外实验，观察了子宫内膜癌细胞雌激素活化PI3K/AKT通路过程中GPER的变化规律，ER有无表达及变化，GPER与PI3K能否免疫共沉淀，高表达GPER的内膜癌细胞阻断GPER作用后对雌激素活化PI3K/AKT通路影响以及阻断GPER-PI3K/AKT通路对内膜癌细胞增殖凋亡和裸鼠成瘤的影响，研究了雌激素激活PI3K/AKT信号通路等非转录效应机制，结果发现：GPER表达多见于绝经后、临床分期较晚和分化较差的子宫内膜腺癌中，与磷酸化AKT协同参与了子宫内膜腺癌的发生发展过程；在子宫内膜癌HEC-1A和Ishikawa细胞中，GPER，而不是ER，介导了雌激素对PI3K/Akt信号通路的活化，参与了子宫内膜癌的非基因转录效应，PTX阻断GPER作用后或采用shRNA技术下调GPER表达后，可抑制雌激素对子宫内膜癌细胞PI3K/Akt信号通路的活化作用；该过程中免疫沉淀未能检测到GPER和PI3K的直接结合，说明GPER和PI3K之间还可能有其他信号分子参与调节；应用抑制剂PTX或者shRNA技术抑制GPER作用后，抑制PI3K/AKT通路活化的同时，可抑制雌激素对子宫内膜癌细胞和裸鼠移植瘤的增殖作用，促使其发生凋亡。该研究对揭示子宫内膜癌的发病规律有重要意义，为子宫内膜癌的有效防治提供新思路。？？？？