中文摘要
运用RRS-酵母双杂交系统从人脐带内皮细胞cDNA表达文库中筛选汉滩病毒受体基因孟俨《驹靥灞泶铩⒋炕泄鼗虿锛袄媚け泶镌靥逭婧俗痉敲舾邢赴锌固逦阶枰帧⒉《靖腥揪赫种萍笆芴逯亟ǖ仁笛椋院禾膊《臼芴褰邢低车募ǎ佣禾膊《靖腥痉⒉』蒲芯亢土俅仓瘟频於ɑ
结题摘要
β3整合素作为汉坦病毒的潜在受体,一直受到广泛重视。研究表明β3整合素并不能完全解释汉坦病毒的感染机制,可能还有其它细胞表面分子参与病毒感染进程。本研究构建了人血管内皮细胞系HuVEC cDNA酵母表达文库,利用RRS酵母双杂交系统筛选汉坦病毒囊膜糖蛋白G1、G2的可能配体,通过生物信息学分析、RRS酵母双杂交系统、免疫共沉淀技术对其进行鉴定。同时构建β3整合素酵母表达载体、真核表达载体,研究其与G1、G2分子间相互作用。还利用噬菌体肽库技术筛选汉滩病毒宿主细胞膜受体结合短肽,利用RRS系统筛选其可能配体分子。研究结果表明,G1、G2可与多种分子相互作用,其中利用G2筛选到β3整合素分子片段。RRS酵母双杂交试验、免疫共沉淀试验表明,β3整合素与G2可相互作用。 目前,对其它G1、G2的配体分子的鉴定仍在进行中。利用噬菌体肽库技术确定受体结合表位为G2 96-YPWHTAKCHY-105,用RRS系统筛选其配体,期望找到汉坦病毒其它可能受体或辅受体。本研究为揭示汉坦病毒感染机制奠定了基础。
