弓形虫病为人和温血动物的严重共患病，疫苗免疫是有效控制本病的上佳策略，抗原和免疫途径最为关键。有效免疫必须用复合抗原，鼻腔免疫为最佳免疫途径。肠黏膜是抗感染的首道防线，肠相关淋巴组织（GALT）在抗感染中可能具重要作用。本项目提出复合抗原鼻内免疫可诱导有效的抗弓形虫感染免疫，GALT的效应部位肠上皮内淋巴细胞（iIEL）和固有层淋巴细胞（LPL）起关键作用的假设。采用复合抗原和鼻内免疫策略，用冰冻

弓形虫感染率高，引起严重人兽共患病，尚无有效治疗药物，研制安全有效的疫苗极为迫切。本课题组前期的研究证实，弓形虫复合抗原（STAg和ESA）鼻内免疫小鼠可诱导高水平的黏膜和系统免疫应答，有很强的抗感染作用。本研究采用免疫组织化学、RNA原位杂交、电镜技术等连续观察，初步明确定经口感染弓形虫速殖子的靶部位为小肠上段黏膜、靶细胞小肠上皮细胞。经弓形虫与IEC-6共培养，进一步证实了速殖子对肠上皮细胞的粘附、侵入、增殖过程。用STAg和/或ESA滴鼻免疫小鼠表明，可诱导高水平GALT免疫应答，有效阻止弓形虫侵入、播散和增殖。同时，细胞因子和抗体分泌细胞（sIgA+B 细胞）的高表达起关键作用。用相同剂量STAg（20μg）以不同途径（鼻、灌胃、皮下注射）免疫小鼠表明，滴鼻免疫诱导的黏膜免疫应答优于经口和皮下免疫。采用蛋白质组技术分析了弓形虫STAg的抗原性，鉴定出弓形虫蛋白质230个，得到的阳性蛋白16个。这些蛋白中，除主要表面抗原P30（SAG1）曾报道具有免疫原性外，其余均为本研究新发现的具有免疫原性的弓形虫蛋白，可作为弓形虫病免疫诊断和疫苗新的候选分子，有待深入研究。