中文摘要
分离并克隆lhcf基因家族在海带雄性配子体中差异表达的lhcf6和fcpf基因,利用荧光定量PCR技术分析海带雌、雄配子体在不同光强、光质、光周期等诱导条件下配子产生过程中这两个基因的时空表达;并针对该类基因mRNA的保守序列及它们各自3'-非翻译区的特异序列分别设计不同的双链RNA,利用RNA干扰技术探讨它们对海带雌、雄配子产生过程中所发生的作用及在该过程中雌、雄之间差异表达的分子机理。为海带配子体繁殖发育的分子生物学研究及配子体无性繁殖系育苗与育种技术中雌、雄配子同时产生的分子调控研究奠定理论基础。
结题摘要
对海带(Laminaria japonica Aresch)雄配子体抑制消减cDNA文库进行生物信息学分析,并通过Northern印迹杂交进一步验证了雄配子体优先表达的基因;随后分离并克隆海带雌、雄配子体中差异表达的lhcf6、lhcf5以及cbbX等基因的cDNA及DNA序列,分析了这些基因的特征以及所包含的生物信息学知识;利用荧光定量PCR技术分析海带雌、雄配子体在不同光强、光质等诱导条件下以及配子产生过程lhcf5、lhcf6及cbbX等基因的时空表达规律,推测了这些基因在海带配子体营养生长以及配子产生过程中的作用;利用基因步移技术,克隆了海带雌、雄配子体lhcf6基因的启动子序列,发现它们差异明显,初步了解到该家族基因差异表达的可能分子机理。这些研究为海带配子体繁殖发育的分子生物学研究及配子体无性繁殖系育苗与育种技术中雌、雄配子同时产生的分子调控研究奠定理论基础。
