中文摘要
国务院政府特殊津贴获得者,浙江省突出贡献的中青年专家。主持"973"计划、国家基金、国家攻关、部省重大重点攻关等课题20余项。首次克隆了鸭IL-2全基因组的DNA序列和鹅的IL-2基因cDNA序列,阐明了鸭IL-2的基因结构,证明了禽IL-2蛋白功能的种属特异性;建立了定量禽白细胞介素-2蛋白含量的TAS-ELISA方法和计算禽细胞因子生物学活性的计算公式。首次完成鸡IL-2受体鉴定及相应单抗制备。建立传染性支气管炎病毒S1基因的马铃薯生物反
结题摘要
围绕动物疫病控制研究中免疫调控机制和新的传染病病原研究薄弱环节,本项目开展了家禽白细胞介素2和CD分子以及猪圆环病毒2的系列研究,取得以下成果:1)利用基因工程技术成功表达了家禽的白细胞介素2、CD25、鸡CD131w、鸡CD132、鸭CD3、鸭CD4、CD8、猪圆环病毒(PCV)Rep和Cap蛋白,获得了纯化的蛋白单体,并以纯化的重组蛋白为免疫原制备了相应的单克隆抗体。2)以制备的单克隆抗体为工具,利用流式细胞术分析了鸡、鸭在H9N2禽流感病毒以及鸡在感染传染性法氏囊病毒情况下的免疫调控机制,证明CD8+CD25+T细胞在抗感染过程中的重要作用。3)以制备的针对PCV衣壳蛋白的单克隆抗体为工具,利用多肽合成技术,精细定位了PCV1和2的型特异性抗原表位。4)利用2D电泳结合质谱鉴定技术,分析了PCV2感染宿主细胞的差异表达蛋白,鉴定差异表达的18个上调蛋白和22个下调蛋白。5)利用蛋白共定位、Pull-down和Co-IP技术,发现了PCV2的Cap蛋白是与细胞骨架Tubulin蛋白相互作用的蛋白。6)证明以CD8+细胞为特点的免疫在保护猪抵抗PCV2感染中的重要作用。
