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苎麻抗炭疽病相关基因的克隆和功能分析

苎麻抗炭疽病相关基因的克隆和功能分析
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  • 批准号:30800696
  • 批准年度: 2008年
  • 学科分类:棉麻类作物遗传育种学(C130506) |
  • 项目负责人:汪波
  • 负责人职称:副教授
  • 依托单位:华中农业大学
  • 资助金额:20万元
  • 项目类别:青年科学基金项目
  • 研究期限:2009年01月01日 至 2011年12月31日
  • 中文关键词: 苎麻;炭疽病;克隆
  • 英文关键词:暂无数据

项目摘要

中文摘要

在苎麻常见病害中,苎麻炭疽病对其纤维品质影响最为严重,目前苎麻炭疽病的抗病机理研究尚未起步。本研究以高抗炭疽病的苎麻品种"华苎4号"为材料,通过抑制性差减杂交(SSH)cDNA文库构建、DNA高密度点阵膜(反向Northern杂交)筛选、Northern杂交以及生物信息学技术,寻找苎麻在接种炭疽病菌前后差异表达的基因,建立苎麻抗炭疽病相关基因表达谱,并从中筛选到与抗炭疽病相关的信号强烈的基因。利用RACE技术对前期获得的抗病相关基因片段的两侧未知序列进行扩增,获得基因的全长。应用生物信息学方法对抗病相关基因的结构及功能进行预测。构建感兴趣基因的表达载体,用其转化苎麻和拟南芥,得到相应转基因植株,验证其功能。初步阐述苎麻炭疽病的抗病机理,为苎麻的抗病分子育种奠定基础。

结题摘要

苎麻炭疽病 (Colletotrichum spp.) 是苎麻上发生普遍而严重的病害之一,关于苎麻炭疽病及抗炭疽病分子生物学研究还未见报道。本研究从我国苎麻主产区采集炭疽病菌感染组织,成功分离到苎麻炭疽病菌株89个,初步鉴定出苎麻炭疽菌病原为Colletotrichum gloeosporioides,C. fructicola, C. siamense和 C. higginsianum。用UPGMA平均聚类法对其中的45个菌株进行RAPD聚类分析,发现苎麻炭疽菌菌株间存在丰富的遗传多样性。对其中代表性菌株HN-3的生物学特性进行了研究。本研究采用并改良了胍-氯仿法,建立了苎麻叶片高质量RNA提取方法一套。采用抑制差减杂交技术(SSH)构建了一个富集炭疽病抗性相关基因片段的差减文库,应用反向Northern 技术筛选出的差异表达克隆经测序后合并为132个EST片段,其中抗病及防御相关序列37条。检索结果表明,本实验所得到的ESTs都没有在苎麻中报道。抗病相关基因中包括来自白杨树受锈病诱导的SSH文库的相关基因、金属硫蛋白、热击蛋白、PR-1.2蛋白、抗逆相关蛋白等。

评估说明

    国家自然科学基金项目“苎麻抗炭疽病相关基因的克隆和功能分析”发布于爱科学iikx,并永久归类于相关科学基金导航中,仅供广大科研工作者查询、学习、选题参考。国科金是根据国家发展科学技术的方针、政策和规划,以及科学技术发展方向,面向全国资助基础研究和应用研究,发挥着促进我国基础研究源头创新的作用。国科金的真正价值在于它能否为科学进步和社会发展带来积极的影响。

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