靶向性不强、转染效率低、杀瘤不充分是制约目前肿瘤病毒治疗的"瓶颈"。本课题利用CIK细胞对肿瘤细胞特异性的识别能力和"逃逸"机体特异性和非特异性清除的特性，应用其作为运载病毒的新型细胞载体，有效携带病毒避免机体特异性和非特异性清除，穿越肿瘤微环境阻隔，靶向性感染并杀伤肿瘤细胞；选用对CIK细胞具有较高感染率的Ad5/F35嵌合病毒作为CIK细胞运载的病毒体，并应用CD40L启动子调控病毒的增殖，使其增殖严格受控于CIK细胞的活化状态，即确保CIK细胞在进入肿瘤组织并被特异性激活后，才能启动病毒增殖和溶瘤作用。从而保证载体细胞的安全和病毒进入肿瘤细胞后的有效复制；Ad5/F35腺病毒可进一步增强CIK细胞对肿瘤细胞的趋向性。通过以上设计，使CIK细胞和病毒二者对肿瘤细胞的杀伤作用形成优势互补，实现CIK细胞和肿瘤选择性增殖腺病毒联合对肝癌等实体瘤安全有效的特异性治疗。

靶向性不强、转染效率低、杀瘤不充分是制约目前肿瘤病毒治疗的“瓶颈”。本课题利用CIK细胞对肿瘤细胞特异性的识别能力和“逃逸”机体特异性和非特异性清除的特性，应用其作为运载病毒的新型细胞载体，有效携带病毒避免机体特异性和非特异性清除，穿越肿瘤微环境阻隔，靶向性感染并杀伤肿瘤细胞；选用对CIK细胞具有较高感染率的Ad5/F35嵌合病毒作为CIK细胞运载的病毒体，并应用CD40L启动子调控病毒的增殖，使其增殖严格受控于CIK细胞的活化状态，即确保CIK细胞在进入肿瘤组织并被特异性激活后，才能启动病毒增殖和溶瘤作用。从而保证载体细胞的安全和病毒进入肿瘤细胞后的有效复制；Ad5/F35腺病毒可进一步增强CIK细胞对肿瘤细胞的趋向性。通过以上设计，使CIK细胞和病毒二者对肿瘤细胞的杀伤作用形成优势互补，实现CIK细胞和肿瘤选择性增殖病毒联合对肝癌等实体瘤安全有效的特异性治疗。本项目以此为依据点，通过体外分子生物学成功构建携带CD40L启动子的慢病毒，通过两步法转染CIK细胞，同时进行携带CD40Lpr-Ad5/F35-TRAIL的CIK细胞体外诱导癌细胞凋亡的研究，携带CD40Lpr-Ad5/F35-TRAIL的CIK细胞组对肿瘤细胞具有明显的克隆抑制效率。在携带CD40Lpr-Ad5/F35-TRAIL的CIK细胞体内抑制肿瘤细胞生长的研究中，HepG2肝癌细胞接种于裸鼠肝脏，每天观察裸鼠的生长状态，在8 d时，进行注射治疗，移植瘤和转移瘤均明显下降，可见携带CD40Lpr-Ad5/F35的CIK细胞的治疗作用。