中文摘要
利用特定基因及小分子物质导入诱导细胞核重新编程获得多能性细胞为再生医学研究的新热点。基于中医"肾藏精"理论,结合补肾中药对干细胞的促增殖与分化作用,本课题拟以Oct-4及Nanog多能性调控基因为切入点,利用RT-PCR和Western Blotting方法,考察常用补肾中药活性成分对脐带间充质干细胞多能性调控基因表达的影响;采用免疫化学染色方法,检测所筛选出的活性成分对脐带间充质干细胞向三胚层细胞分化能力的影响;通过研究活性成分对脐带间充质干细胞在基因组整体水平及特定基因水平表观遗传学修饰的变化,阐明补肾中药活性成分诱导脐带间充质干细胞多能性的分子机制。发现补肾中药活性成分诱导干细胞多能性与药物"补肾生精"作用的相关性,拓宽人们对中医"肾藏精"理论的现代认识和理解。同时为脐带间充质干细胞广泛应用于再生医学提供理论和实验依据。
结题摘要
利用特定基因及小分子物质导入诱导细胞核重新编程获得多能性细胞为再生医学研究的新热点。基于中医"肾藏精"理论,结合补肾中药对干细胞的促增殖与分化作用,本课题以Oct-4 及Nanog 多能性调控基因为切入点,通过RT-PCR和免疫化学染色方法,分别检测出补肾中药淫羊藿苷100umol/L作用脐带间充质干细胞后能促进多能性调控基因Oct-4 mRNA的表达。在此基础上,通过体外实验表明淫羊藿苷作用脐带间充质干细胞一周能够促使其向神经细胞,心肌细胞,胰岛细胞的分化,明确了hUMSCs体外具有向三胚层细胞分化的能力,体内实验建立代表三个胚层不同器官的损伤模型,移植ICA干预后的hUMSCs,通过评价模型动物各项机能指标和移植细胞分化能力情况,进一步验证了补肾中药活性成分对hUMSCs分化多能性的影响。同时通过研究淫羊藿苷对脐带间充质干细胞在基因组整体水平的变化,表明淫羊藿苷作用脐带间充质干细胞一周后,能够降低多能性调控基因Oct-4甲基化水平和促进组蛋白H3K9乙酰化水平。最终结果表明淫羊藿苷作用于脐带间充质干细胞后能够增强其多能性,揭示出淫羊藿苷干作用于脐带间充质干细胞的分子生物学机制,为脐带间充质干细胞广泛应用于再生医学提供理论和实验依据。本课题发表学术论文8篇,1篇SCI收录;培养硕士研究生3名(1名为非洲留学生);培养中青年学术带头人2名。
