β-防御素Gal-6是鸡小肠上皮细胞中具有诱导表达特点的重要抗菌肽，对维持肠道微生态平衡和免疫稳态发挥重要作用。益生乳酸杆菌作为鸡小肠的优势菌群，通过黏附作用附着在上皮细胞表面并与之发生相互作用,调节上皮细胞的生理功能。那么这一相互作用是否引起鸡小肠上皮细胞抗菌肽的表达变化？目前未见相关报道。本研究采用体外培养的鸡小肠上皮细胞模型，利用RT-PCR、免疫细胞化学和Western blot等技术检测不同乳酸杆菌及其细胞组分刺激上皮细胞后Gal-6的表达变化，比较不同乳酸杆菌及其细胞组分诱导Gal-6表达的可能性和差异性。同时，从TLR2介导的信号通路探讨乳酸杆菌调控Gal-6基因表达的信号转导途径。本研究从益生菌与上皮细胞抗菌肽表达关系的新角度解析益生菌发挥益生作用的新途径和机制，研究结果有助于深入揭示益生菌调节肠道功能的分子机制，且为今后益生菌的筛选、遗传修饰及推广应用提供新的思路和依据。

益生菌在与小肠上皮细胞相互作用过程中能否通过促进抗菌肽如防御素的表达而发挥其益生作用？针对这一科学问题，我们选用8株益生乳酸菌与原代鸡小肠上皮细胞共培养，利用实时荧光定量PCR研究刺激后上皮细胞β-防御素-9（AvBD9，原名Gal-6）基因表达水平的差异。结果表明，在不同菌株及不同浓度之间AvBD9的表达存在差异。所选的8株菌中，鼠李糖乳杆菌MLGA上调AvBD9表达的能力最强。热灭活的鼠李糖乳杆菌MLGA及其组分完整细胞壁、细胞壁蛋白、脂磷壁酸、完整肽聚糖和细菌培养上清亦能促进AvBD9基因的表达，其中肽聚糖促进AvBD9表达的能力最强。本研究表明，从促进防御素表达的角度看，"活"的状态并不是益生菌发挥其益生作用的必需条件。研究进一步发现，鼠李糖乳杆菌MLGA及其组分肽聚糖通过TLR2－NF-κB/AP-1信号通路诱导上皮细胞AvBD9的表达。本项目还首次制备了AvBD9多克隆抗体，免疫印迹检测证实，AvBD9肽可分泌至细胞外而发挥其生物学作用。本项目从益生菌与上皮细胞抗菌肽表达关系新角度解析了益生菌发挥益生作用的新途径和机制，结果有助于深入揭示益生菌调节肠道免疫功能的分子机制。