中文摘要
小鼠是近年来肾脏生理学、病理生理学乃至基因遗传学研究的主要实验动物。本研究在前期计算机辅助的三维重建小鼠肾单位及集合管的基础上,采用免疫细胞化学、电子显微学技术及计算机数据处理手段对参与肾脏重要功能活动的膜受体蛋白质Megalin和Cubilin、水通道蛋白、尿素转运体等做准确定位分布研究。Megalin和Cubilin是大部分肾小球滤过蛋白质在肾脏近端小管重吸收的主要细胞内吞受体。两种受体表达
结题摘要
本研究利用小鼠肾连续切片,并在计算机辅助的三维重建肾单位的基础上,采用免疫细胞化学等技术对水通道蛋白-1(AQP-1)、尿素转运体A2(UT-A2)及膜受体Megalin和Cubilin的分布进行定位研究。在技术方法上,突破了传统的免疫细胞化学对戊二醛及锇酸前后固定并树脂包埋的组织切片的蛋白表达的限制。研究的重要结果包括:1)在肾外髓,AQP-1表达在直小血管降支及长髓袢肾单位的降支细段。与以往研究结果不同,90% 的短髓袢肾单位降支细段不表达AQP-1。2)UTA-2分布在肾外髓短髓袢降支细段的远端28-44%。前期小鼠肾单位三位重建的研究结果表明:在肾外髓,占肾单位82%的短髓袢肾单位降支细段走行在直小血管束中,并与直小血管升降支空间关系密切,有可能参与直小血管逆流交换的过程。这段以往研究被确定为水通透的节段被本研究证明并没有水通道蛋白的分布,结合UT-A2分布的特征,本结果对阐述肾外髓水及尿素的转运、肾小管逆流倍增及交换的机制具有重要理论价值。此外,蛋白质在近端小管重吸收的受体megalin 和cubilin及AQP-1表达强度不均一,需要进一步确立表达与不表达节段长度。
